Desenvolvimento de métodos para a quantificação direta de Salmonella sp. por PCR-tempo real e por transcriptase reversa-PCR-tempo real

Fröder, Hans

doi:10.11606/t.9.2008.tde-25012011-175156

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“…Diferencia-se da PCR pela possibilidade de detecção, no decorrer da reação, do aumento do número de cópias do DNA alvo, e isso se deve graças à compostos fluorescentes presentes no meio da reação, além da amplificação do DNA ser diretamente proporcional à intensidade da resposta. Ao contrário da PCR convencional (semiquantitativo), os ciclos de anelamento extensão da PCR em Tempo Real ocorrem simultaneamente, pois o produto obtido devem ter, no máximo, 100 pb (FRÖDER, 2008;NASCIMENTO;SUAREZ;PINHAL, 2010).…”

Section: Pcr Em Tempo Real (Q-pcr)unclassified

Análise físico-química e microbiológica por método moleular, de pratos prontos radapertizados para suprimentação alimentar de imunodeprimidos

Walder¹

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Section: Pcr Em Tempo Real (Q-pcr)unclassified

Análise físico-química e microbiológica por método moleular, de pratos prontos radapertizados para suprimentação alimentar de imunodeprimidos

Walder¹

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Avaliação E Padronização Da PCR Em Tempo Real Para Identificação De Espécies Animais Em Alimentos Processados

Fröder,

Gheno,

Righi

2024

Rev. Foco

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O aumento da conscientização dos consumidores sobre alimentos decorre principalmente de motivos ideológicos, questões relacionadas à saúde e religião, bem como da sensibilização crescente devido aos frequentes casos de fraude alimentar. Sendo assim, é possível verificar a correta declaração de ingredientes de origem animal por meio da detecção de uma sequência específica de DNA dos ingredientes de origem animal correspondentes, uma vez que cada espécie possui um único genoma. Este estudo teve como objetivo avaliar se o sistema iniciador-sonda espécie-específico detecta individualmente cada espécie animal (bovino, suíno, frango, ovino e equino) utilizando a sonda TaqMan® e o sistema iniciador-espécie-específico com o corante SYBR® Green. Os resultados revelaram que os sistemas primer-sonda são específicos e amplificam corretamente os respectivos DNAs de cada espécie animal, mesmo quando combinados em um único microtubo. O gene de referência (miostatina) foi utilizado para verificar a amplificação de ácidos nucleicos e como controle positivo (também co-amplificado na PCR), indicou a exclusão de resultados falso-negativos. Observou-se que as informações contidas nos sete produtos cárneos processados estavam 100% condizentes com o rótulo do fabricante. Tanto a sonda quanto o mastermix SYBR® Green apresentaram resultados concordantes, embora, para o corante, seja necessário reduzir o número de ciclos para evitar resultados falso-positivos ou acúmulo de sinal fluorescente nos ciclos finais da PCR.

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Desenvolvimento de métodos para a quantificação direta de Salmonella sp. por PCR-tempo real e por transcriptase reversa-PCR-tempo real

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Análise físico-química e microbiológica por método moleular, de pratos prontos radapertizados para suprimentação alimentar de imunodeprimidos

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