The objectives of this study were 1) to determine whether a biochip array-based immunoassay could be used to detect 6 different group antimicrobials in porcine oral fluids collected under experimental conditions; 2) to determine the feasibility of antimicrobial detection in clean versus dirty oral fluid samples; and 3) to determine if the assay could be used to detect chlortetracycline in oral fluids of swine ingesting a routine diet containing chlortetracycline. Biochip array-based immunoassay is currently used for simultaneous detection and quantitation of different group six antimicrobials in milk, urine, meat, honey, and feed. The assay had not been investigated for potential use in oral fluids. Following evaluation of different extraction procedures, a centrifugation method was chosen. Results showed that of the six target drugs, norfloxacin, ceftiofur, florfenicol, streptomycin, tylosin and tetracycline could be detected in both clean and dirty oral fluid samples. However, tetracycline was not well recovered in dirty samples. Chlortetracycline from tetracycline group was detected in all oral fluid samples collected from the field at concentrations ranging from 176.0-698.6 ppb. In conclusion, this assay can detect all target antibacterials from different groups in clean and dirty oral fluid samples with the exception of tetracycline which was not well-recovered from in dirty samples.
Keywords: Antimicrobials, Biochip array-based immunoassay, Oral fluid, Swine
Domuz Ağız Sıvısında Altı Farklı Grup Antimikrobiyal İlacın Aynı Anda Biochip Array-Based Immunoassay ile Tayini
ÖzetÇalışmanın amacı Biochip array-based immunoassay yöntemi ile 6 farklı grup antibakteriyel ilacın deneysel şartlarda toplanmış domuz ağız sıvısında tespit edilip edilemediğini; temiz ve kirli domuz ağız sularında bu antimikrobiyallerin tespit edilebilirliğini ve bu metotla, rasyonlarında sürekli olarak klortetrasiklin bulunan domuzların ağız sıvılarında klortetrasiklinin tespit edilebilirliğini belirlemektir. Bu metod, aynı anda altı farklı grup antimikrobiyalin süt, idrar, et, bal ve yem numunelerinde miktarlarının belirlenmesinde kullanılmaktadır, ancak ağız sıvılarında tespit edilebilirlikleri henüz araştırılmamıştır. Yapılan farklı ekstraksiyon çalışmalarından sonra bir santrifüj metodu seçildi. Bu metodla hedef ilaç olan norfloksasin, seftifor, florfenikol, streptomisin, taylosin ve tetrasiklin temiz ve kirli domuz ağız sıvısında tespit edildi. Ancak, kirli ağız sularında tetrasiklinin geri kazanımı oldukça düşük olarak elde edildi. Klortetrasiklin çiftlikteki domuzların ağız sıvılarında 176.0-698.6 ppb arasında tespit edildi. Sonuç olarak, bu test ile kirli ağız sıvısında tetrasiklin aranması dışında, altı farklı gruptaki hedef antibakteriyel ilaç domuzların ağız sıvısında kolaylıkla tespit edilebilmektedir.