Катионные поверхностно-активные вещества являются одним из классов веществ, наиболее часто использующихся в качестве активнодействующих в дезинфицирующих средствах. Тенденцией последних лет является использование смесей нескольких биоцидов, что ставит новые задачи перед аналитической химией. В этой работе описан метод для определения при совместном присутствии в дезинфицирующих средствах алкилдиметилбензиламмоний хлорида (АДБАХ), алкилдиметил(этилбензил)аммоний хлорида (АДЭБАХ), хлоргексидина биглюконата (ХГБГ) и полигексаметиленбигуанид гидрохлорида (ПГМБ). Методы. Предложенный метод основан на применении обращенно-фазовой и гидрофильной высокоэффективной жидкостной хроматографии с диодно-матричным детектированием. Результаты. Наилучшее разделение АДБАХ, АДЭБАХ и ХГБГ было достигнуто при использовании колонки, заполненной модифицированным сферическим силикагелем (5 мкм, 4.6×250 мм) в режиме градиентного элюирования. В качестве элюентов использовали ацетонитрил и ацетатный буфер с рН 5.4 при скорости потока 1 мл/мин. Для определения ПГМБ в присутствии рассматриваемых веществ была использована гидрофильная высокоэффективная жидкостная хроматография. Наилучшее разделение было достигнуто на аминофазной колонке (5 мкм, 4.6 × 250 мм) при использовании тех же элюентов. Для определения всех рассматриваемых веществ использовали диодно-матричный детектор. 3D хроматограммы регистрировали в диапазоне длин волн от 190 до 400 нм. Выводы. Проведенные исследования показали, что результат анализа не зависит от соотношения катионных поверхностно-активных веществ в дезинфицирующих средствах. Также отсутствует влияние N,N-бис(3-аминопропил)додециламина (Триамин, TA) и наиболее часто используемых для изготовления дезинфицирующих средств компонентов, что было подтверждено при апробации метода для анализа реальных объектов. Диапазон линейности для АДБАХ составил от 0.0062 до 0.97 %, для АДЭБАХ-от 0.000726 до 0.201 %, для ХГБГ-от 0.0128 до 0.111 %, для ПГМБ-от 0.00311 до 0.0205 %. Рассчитанная относительная погрешность для всех определяемых веществ составила около 4 %. Ключевые слова: алкилдиметилбензиламмоний хлорид, алкилдиметил(этилбензил)аммоний хлорид, хлоргексидина биглюконат, полигексаметиленбигуанид гидрохлорид, катионные ПАВ, дезинфицирующие средства, высокоэффективная жидкостная хромато графия.