Development and validation of an LC‐MS/MS method for simultaneous quantification of levodopa and MD01 in rat plasma and its application to a pharmacokinetic study of mucuna pruriens extract

Abstract

Mucuna pruriens, an ancient Indian herbal medicine containing levodopa, is widely used for Parkinson's disease. In order to simultaneously determine levodopa and 1,1-dimethyl-3-carboxy-6,7-dihydroxy-1,2,3,4-tetrahydroisoquinoline (MD01) in rat plasma, an improved LC-MS/MS method was developed and validated for a pharmacokinetic study in rats orally administered levodopa or Mucuna pruriens extract (MPE). Elimination of matrix effect and improvement of extraction recovery were achieved through systematic optimization of reversed-phase and hydrophilic interaction chromatographic conditions together with sample clean-up procedures. A satisfactory chromatographic performance was obtained with a Thermo Aquasil C18 column (50 × 2.1 mm, 3 µm) using acetonitrile and water containing 0.2% formic acid as mobile phases. Futhermore, sodium metabisulfite and formic acid were used as stabilizers in neat solutions as well as rat plasma. The method was validated in a dynamic range of 20.0-10,000 ng/mL for levodopa and MD01; the intra- and inter-day precision and accuracy were acceptable. The method was successfully utilized to determine the levodopa level in plasma samples of rats administered levodopa or MPE. Pharmacokinetic results showed that an increase in the AUC of levodopa was observed in rats following oral administration of multiple doses of MPE. Copyright © 2016 John Wiley & Sons, Ltd.

Piperine improves levodopa availability in the 6‐OHDA‐lesioned rat model of Parkinson's disease by suppressing gut bacterial tyrosine decarboxylase

“…After fasted for 12 h, blood samples of rats were collected into heparinized tubes at various time points of 0, 0.25, 0.5, 1, 2, 3, 4, 6, and 10 h after dosing. After centrifugation at 1000 g (4°C) for 20 min, 50 μL plasma was separated and mixed with 400 μL of acetonitrile containing 2% formic acid and 0.5% sodium pyrosulfite, then vortexed for 5 min to precipitate proteins 23 . After centrifugation at 12,000 g (4°C) for 20 min, 350 μL of supernatant was dried under the N 2 atmosphere and re‐dissolved in 100 μL of 0.2% formic acid aqueous solution.…”

“…After centrifugation at 1000 g (4°C) for 20 min, 50 μL plasma was separated and mixed with 400 μL of acetonitrile containing 2% formic acid and 0.5% sodium pyrosulfite, then vortexed for 5 min to precipitate proteins. 23 After centrifugation at 12,000 g (4°C) for 20 min, 350 μL of supernatant was dried under the N 2 atmosphere and re‐dissolved in 100 μL of 0.2% formic acid aqueous solution. After centrifugation again, the supernatant was obtained for HPLC‐FLD analysis.…”

Optimizing ex vivo culture conditions to study human gut microbiome

“…The MS detector was operated in multiple reaction monitoring (MRM) mode. The optimized mass spectrometric parameters, Q1 and Q3 fragmention, collision energies (CE), declustering potential (DP), entrance potential (EP), collision cell exit potential (CXP) descriptions are shown in Table S4 [21][22][23][24][25].…”

Desenvolvimento de fase monolítica com grupos amino e nano partículas para a determinação de carbidopa, levodopa, benserazida, dopamina e 3-O-metildopa em amostras de plasma de pacientes com a doença de Parkinson por HILIC-MS/MS no modo column switching

“…A doença de Parkinson (DP) é uma desordem neurodegenerativa crônica e progressiva que afeta cerca de 1% da população mundial com mais de 65 anos de idade (BARBOSA et al, 2006;MARTINS et al, 2013). É considerada a segunda patologia neurodegenerativa mais frequente no mundo, atrás apenas da doença de Alzheimer (OLANOW;TATTON, 1999;MERRIT;ROWLAND, 2000;DE LAU;BRETELER, 2006 Já a fase móvel (FM) é semelhante à utilizada em cromatografia em fase reversa, composta por uma mistura de uma solução aquosa (baixa concentração) com um solvente orgânico (OYLER et al, 1996;GARBIS et al, 2001;OLSEN, 2001;NGUYEN;SCHUG, 2008;BUSZEWSKI;NOGA, 2012;YANG et al, 2016). A fase móvel clássica consiste em uma solução contendo um solvente aprótico como a acetonitrila e um solvente prótico como a água (com proporção de acetonitrila > 70%, geralmente entre 70-95%…”

“…interações eletrostáticas entre os grupos ionizados dos analitos com grupos iônicos ancorados na fase estacionária ou com os grupos silanóis residuais da superfície da sílica(HEMSTRÖM;IRGUM, 2006;BUSZEWSKI;NOGA, 2012;LIANG et al, 2015). de solvente orgânico, permitindo que os extratos sejam injetados diretamente no sistema cromatográfico; (b) quando comparada a RP-HPLC, apresenta maior eficiência na retenção de compostos polares; (c) diminuição na pressão do sistema visto que a viscosidade da fase móvel também diminui com a alta concentração de solvente orgânico; (d) quando acoplada a espectrometria de massas, proporciona um aumento da sensibilidade analítica, da ionização por eletrospray e da capacidade de dessolvatação, devido à alta proporção de solvente orgânico utilizada na fase móvel(MCCALLEY, 2007;BUSZEWSKI;NOGA, 2012;YANG et al, 2016).As amostras biológicas possuem vários componentes interferentes que podem suprimir a ionização dos analitos nas análises LC-MS/MS, coeluir com os analitos durante a separação cromatográfica ou adsorver de forma irreversível junto à coluna analítica, diminuindo o tempo de vida útil da coluna e modificando a retenção dos analitos (QUEIROZ; COLLINS; JARDIM, 2001). Dessa maneira, o preparo de amostra é uma etapa importante no desenvolvimento de métodos cromatográficos, pois elimina grande parte dos componentes interferentes da matriz biológica e pré-concentra os fármacos quase sempre presentes em níveis de traços (QUEIROZ; MELO, 2014).…”