Dosage de l’hémoglobine urinaire par un réactif au 3,3’-diméthylbenzidine : Mise au point technique

Abstract

RESUMELa mesure de la teneur en hémoglobine dans les milieux biologiques relève de plusieurs techniques. L'objectif de ce travail était de déterminer la teneur en hémoglobine des urines lors d'une hémolyse intra vasculaire par un réactif au 3,3'-diméthylbenzidine. A partir d'une solution d'hémoglobine humaine dont la concentration a été déterminée par le réactif de Drabkin, une méthode en point final utilisant le 3,3'-diméthylbenzidine comme chromogène en présence de H 2 O 2 a été évaluée par sa sensibilité, sa répétabilité, sa reproductibilité et l'interférence de la bilirubine. Elle a ensuite été utilisée pour doser l'hémoglobine dans les urines de 56 malades présentant une hémolyse intra vasculaire aiguë. La linéarité de la méthode était bonne entre 0,06 et 1 g/L d'hémoglobine ; sa limite inférieure de détection était de 3 mg/L d'hémoglobine ; la bilirubine n'interférait pas sur la méthode à la concentration de 100 mg/L. La répétabilité (coefficient de variation intra essai = 3,12%, 2,36% et 1,27% respectivement pour des solutions d'hémoglobine de concentration 0,25, 0,5 et 1 g/L) et la reproductibilité (coefficient de variation inter essai = 4,15%, 3,12% et 1,67% respectivement pour des solutions d'hémoglobine de concentration 0,25, 0,5 et 1 g/L) pour 20 essais étaient bonnes. Cette méthode peut être utilisée en pratique courante quotidienne pour le dosage de l'hémoglobine urinaire dans les laboratoires de chimie clinique.

Exploring association between MBL2 gene polymorphisms and the occurrence of clinical blackwater fever through a case–control study in Congolese children

“…Twenty mL of fresh urine were collected from each participant. The presence of haemoglobin in urine was first detected by urinary dip strip (Medi test Combi9, Mach-eryEur, Paris, France) and then confirmed by spectrometer (Thermo Genesis 10 BIO, New York, USA) using protocol of 3,3′ dimethyl benzidine reagent [38]. The results of urine dip stick were read as either negative (yellow colour) or positive (change in blue colour) 1+, 2+, 3+, which corresponded approximately to haemoglobin concentrations of respectively 0.061 ± 0.0166 mg/L, 0.3986 ± 0.2612 mg/dL and 0.5679 ± 0.27688 mg/L as quantified using the spectrometer.…”