Effect of Amino Acids on Goat Cauda Epididymal Sperm Cryopreservation Using a Chemically Defined Model System

Kundu, C.N.; Das, Kinsuk; Majumder, Gopal C.

doi:10.1006/cryo.2001.2296

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“…A associação benéfica na motilidade espermática entre crioprotetores e aminoácidos constatada em equinos (Khlifaoui et al, 2005) e em outras espécies (Kundu et al, 2001;He & Woods 2003) não ficou evidenciada neste trabalho, possivelmente porque não foi reduzido o volume dos crioprotetores descritos por Vidament et al (2002), enquanto Khlifaoui et al (2005) reduziram o volume do glicerol, o qual não estava associado com dimetilformamida, para adição de glutamina. É possível que a concentração dos aminoácidos idealizada por Kundu et al (2001) não seja a mesma para utilização com o meio proposto por Vidament et al (2002) contendo glicerol e dimetilformamida com o objetivo de melhorar os parâmetros de motilidade espermática.…”

Section: Resultsunclassified

“…É possível que a concentração dos aminoácidos idealizada por Kundu et al (2001) não seja a mesma para utilização com o meio proposto por Vidament et al (2002) contendo glicerol e dimetilformamida com o objetivo de melhorar os parâmetros de motilidade espermática.…”

Section: Resultsunclassified

“…A adição de aminoácidos (Sigma-Aldrich ® ) ao meio crioprotetor foi adaptada ao diluente de congelamento equino, conforme descrito por Kundu et al (2001), utilizando-se 40 mM de alanina, 40 mM de glicina ou 60 mM de glutamina, testando-se também a redução na concentração desses aminoácidos para 7 mM de alanina + 7 mM de glicina + 20 mM de glutamina e uma associação de todas as concentrações ideais verificadas por Kundu et al (2001) contendo 40 mM de alanina + 40 mM glicina + 60 mM de glutamina. Foram avaliados os parâmetros de motilidade e cinética espermática utilizando-se o programa Ceros, versão 10.8, da Hamilton Thorn Research (HTM-CEROS), de funcionalidade de membrana plasmática pelo teste hiposmótico (Dell 'Aqua Jr. et al, 2001) e de integridade de membrana acrossomal pelo teste FITC-PSA.…”

Section: Methodsunclassified

“…Kundu et al (2001) obtiveram êxito no congelamento de espermatozoides caprinos utilizando apenas aminoácidos como crioprotetores e relataram que os melhores resultados foram obtidos com associação de 40 mM de alanina, 60 mM de glutamina, 20 mM de prolina ou 40 mM de glicina com glicerol e dimetilsulfóxido (Me 2 SO). Desse modo, sugeriram que essa mistura de crioprotetores pode ser benéfica para a criopreservação de sêmen de várias espécies.…”

Section: Introductionunclassified

“…He & Woods (2003) também observaram melhor crioproteção utilizando alanina ou glicina associada ao Me 2 SO em espermatozoides de peixe "baixo listrado" (Morone saxatilis). A glicina tem sido usada com sucesso como crioprotetor não-penetrante para criopreservar espermatozoides e aumentar a motilidade pós-descongelamento (Kundu et al, 2001;He & Woods 2003). He & Woods (2004b) observaram que a glicina protege a mitocôndria e seu conteúdo de ATP, mas não protege a integridade da membrana plasmática espermática no pós-descongelamento.…”

Section: Introductionunclassified

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Adição de alanina, glicina e glutamina ao meio crioprotetor seminal de garanhões Mangalarga Marchador

Fagundes

Silva²,

Shimoya

et al. 2010

R. Bras. Zootec.

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RESUMO -Objetivou-se neste trabalho verificar o efeito da adição de alanina, glicina e glutamina ao meio crioprotetor seminal de garanhões Mangalarga Marchador. Foram utilizados cinco garanhões provenientes do haras Lugavi. Três ejaculados de cada garanhão, após coleta e avaliação, foram divididos em seis tratamentos: sem adição de aminoácidos, adição de 40 mM de alanina, adição de 40 mM de glicina, adição de 60 mM de glutamina, adição de 7 mM de alanina + 7 mM de glicina + 20 mM de glutamina e adição de 40 mM de alanina + 40 mM de glicina + 60 mM de glutamina ao diluente de congelamento convencional. Foram avaliados os parâmetros motilidade total, motilidade progressiva, retidão, linearidade, velocidade média do percurso, velocidade linear, velocidade curvilínea, amplitude lateral de cabeça e frequência de batimentos dos espermatozoides por meio de análise espermática assistida por computador (CASA), funcionalidade da membrana plasmática por choque hiposmótico e integridade de membrana acrossomal pelo teste FITC-PSA. Não houve melhora nos parâmetros de motilidade e cinética espermática nem na funcionalidade de membrana, entretanto, a adição de aminoácidos ao meio crioprotetor seminal aumentou o número de espermatozoides com membrana acrossomal íntegra. Os melhores resultados neste teste são obtidos com 40 mM de alanina (78,6 ± 13,6), 40 mM de glicina (74,7 ± 19,6) ou 7 mM de alanina + 7 mM de glicina + 20 mM de glutamina ejaculates from each stallion were divided into six treatments: without the addition of amino acids, addition of 40 mM alanine, addition of 40 mM glycine, addition of 60 mM glutamine, addition of 7 mM glycine, alanine 7 mM + 20 mM glutamine and addition of 40 mM of glycine + 40 mM of alanine + 60 mM of glutamine to conventional frozen extender. The parameters evaluated were total motility, progressive motility, straightness, linearity, path velocity, progressive velocity, track speed, lateral amplitude and beat frequency by computer assisted sperm analysis (CASA), functionality of plasmatic membrane by hypo-osmotic shock and acrossomal membrane integrity by the FITC-PSA test. No improvement was found in the kinematic parameters and sperm motility and nor in membrane functionality but the addition of amino acids to seminal extender resulted in a higher integrity of the acrossomal membrane. The best results obtained in this test are with 40 mM alanine (78.6 ± 13.6), 40 mM glycine (74.7 ± 19.6) or 7 mM glycine, alanine 7 mM + 20 mM glutamine (76.8 ± 17.5), however, more studies should be conducted to reach the ideal concentration of these components.

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Section: Resultsunclassified

Section: Methodsunclassified

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Silva²,

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Liposomes in Adjuvant Systems for Parenteral Delivery of Vaccines

Christensen

Korsholm

Wood

et al. 2009

Delivery Technologies for Biopharmaceuticals

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Effect of amino acids on cryopreservation of cynomolgus monkey (macaca fascicularis) sperm

Zhang

et al. 2003

American J Primatol

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The effects of three amino acids (proline, glutamine, and glycine) added to the freezing medium Tes-Tris-egg yolk (TTE) for cryopreservation of cynomolgus monkey (Macaca fascicularis) spermatozoa were studied. This is the first report on the effects of amino acids on nonhuman primate sperm cryopreservation. The addition of 5mM proline, 10mM glutamine, and 10 or 20mM glycine each significantly improved post-thaw sperm motility and membrane and acrosome integrity compared with the control (TTE alone). However, a significant decrease in motility and membrane/acrosome integrity was observed when amino acid concentrations increased to 60mM for proline and glutamine, and 80 mM for glycine. The results suggest that adding a limited amount of amino acids to the freezing media is beneficial for freezing cynomolgus monkey sperm.

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Effect of Amino Acids on Goat Cauda Epididymal Sperm Cryopreservation Using a Chemically Defined Model System

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