Eine neue Methode zur chemischen Bestimmung der östrogenen Hormone im Harn

Abstract

Von der Vielzahl der zur Östrogenbestimmung vorgeschlagenen chemischen Nachweisreaktionen ist die Reaktion nach Kober 1 am besten untersucht und am meisten angewandt worden.Kob er stellte fest, daß Östron und östriol beim Erhitzen mit Phenol-Schwefelsäure und anschließendem Verdünnen mit Wasser eine rote Färbung ergeben, die sehr spezifisch für Phenole vom Typ der natürlichen östrogenen Hormone ist. Seither wurden zahlreiche Versuche unternommen, mittels dieser Reaktion oder einer ihrer vielen Modifikationen quantitative östrogenbestimmungen im Harn durchzuführen. Da jedoch in Harnextrakten neben den östrogenen noch Substanzen vorhanden sind, die eine unspezifische störende Braunfärbung bei dieser Reaktion ergeben, ließ sich die Kob er-Reaktion zunächst nur für relativ östrogenreiche Extrakte aus der mittleren bis späten Gravidität verwenden. Um auch Harne von geringerem östrogengehalt untersuchen zu können, versuchte man, die unspezifische Braunfärbung getrennt zu messen, indem man einerseits optische Korrekturformeln 2 ' 3 anwandte, anderseits den spezifischen Farbstoff nach der Messung durch Erhitzen 4 , Acetonzusatz 5 oder Peroxydbehandlung 6 zerstörte oder einen Teil der Verunreinigungen aus dem Reaktionsgemisch extrahierte 7 .Da keine dieser Methoden der Kritik standhielt, wenn große Mengen an Verunreinigungen kleinen östrogenmengen gegenüberstanden, schlug man einen anderen Weg zur Lösung dieses Problems ein, indem man die östrogenfraktionen vor der Nachweisreaktion intensiv zu reinigen versuchte. Die Verteilung zwischen verschiedenen, nicht mischbaren Lösungsmittelpaaren 8 , Gegenstromverteilung 9 , * Auszugsweise vorgetragen anläßlich der Arbeitstagung der Gynäkologischen

Urinary Oestrogen Levels in the Sow During Oestrous Cycle and Early Pregnancy

“…The fluorescence spectra of the Kober colour substances in tetrachlorethane (Ittrich, 1958) were recorded in a Beckman model DU monochromator equipped with a spectrofluorimetry attachment made in the laboratory (Lunaas, unpublished).…”

Biochemical Tests for the Assessment of Feto-Placental Function

“…Corrections are normally made for variable non-specific chrornogens by the method of Allen (1950). The chromogens may be extracted in chloroform containing p-nitro phenol or trichloracetic acid to give an intense fluorescence (Ittrich, 1958) providing greater specificity and sensitivity. Recently, partially automated techniques have been introduced (Ua Conaill and Muir, 1968;Dixon, 1969), but the requirement for hydrolysis of oestrogen conjugates has been a stumbling block to full automation.…”

Urinary Estrogens as a Measure of Fetoplacental Well-Being

“…In urines with low estrogen concentrations (postmenopausal female, normal male) this method was not adequate. Ittrich 16 described an additional purification step consisting of extraction of the Kober chromogens with a solution of p-nitrophenol in a chlorinated or brominated organic solvent after the Kober color reaction. Ittrich's original method used chloroform; other POSTGRADUATE MEDICINE workers have found tetrachloroethane and tetrabromoethane more suitable.…”