Burkholderia pseudomallei adalah jenis bakteri saprofit, bersifat patogen oportunistik, dan sebagai agen penyebab penyakit melioidosis. Bakteri ini banyak ditemukan hidup di tanah, air, maupun pada sawah pertanian. Kasus kejadian penyakit melioidosis telah banyak dilaporkan di wilayah negara Asia, namun belum banyak informasi spesifik mengenai kejadian penyakit tersebut di Indonesia. Penelitian bertujuan untuk mengidentifikasi bakteri tanah Burkholderia pseudomalllei di Kota Makassar. Pengambilan sampel dilakukan secara acak di 11 kecamatan di Kota Makassar, yaitu Mamajang, Tamalate, Rappocini, Mariso, Bontoala, Wajo, Biringkanaya, Manggala, Tamalanrea, Tallo, dan Makassar. Analisis data menggunakan metode kualitatif deskriptif dalam bentuk gambar dan tabel. Kulturisasi isolat menggunakan medium selektif Ashdown Agar. Identifikasi bakteri menggunakan pengecatan gram, dan beberapa uji biokimiawi. Hasil penelitian diperoleh sebanyak 100 isolat sampel, masing-masing 28 isolat sampel positif Burkholderia pseudomalllei dan 72 isolat bakteri jenis lain. Penelitian disimpulkan bahwa terdapat persebaran bakteri Burkholderia pseudomallei di Kota Makassar, sehingga disarankan dapat menjadi acuan untuk penelitian lanjutan tentang penyakit melioidosis.