“…Key words: Tree shrew; Sperm cryopreservation; Extender; Monoamines 树鼩具有许多灵长类动物的特征 (Poonkhum et al, 2000), 被广泛应用于生物医学研究中, 如神经 生物学 (Remple et al, 2007)、人类病毒性肝炎 (Xu et al, 2007;Li et al, 2009)、视觉系统发育 (Poveda & Kretz , 2009)、群体社会阶层应激 (Kozicz et al, 2008;Zambello et al, 2010)、生殖和发育生物学 (Collins et al, 2007)等。不仅如此, 它的体型小, 世代周期短、 繁殖效率高, 将会越来越多地应用于生物医学研究 领域。 由于树鼩具有比较丰富的遗传多样性 (Chen et al, 2011), 精子冷冻能够经济、 有效地保存有价值的 遗传资源, 但到目前为止, 仅有一篇文献报道了冷 冻降温速率、冷冻平衡时间和冷冻稀释液对树鼩精 子冷冻存活率的影响 (Ping et al, 2011), 而其他冷冻 稀释液和冷冻剂对树鼩精子的冷冻影响以及能否 提高冷冻存活率还有待研究。 冷冻稀释液是影响精子冷冻存活率和受精能 力的一个重要因素, 而关于树鼩精子冷冻稀释液的 选择, 仅有一篇文献比较了基于 Tris-TES 的两种冷 冻稀释液--TTE 和 TEST 对树鼩精子冷冻存活率 的影响 (Ping et al, 2011)。然而, 已经有很多种稀释 液 被 应 用 于 哺 乳 动 物 精 子 冷 冻 保 存 中 , 如 基 于 Tris-TES 的 TTE 和 TTG 分别用于非人灵长类动物 和羊的精子冷冻保存 (Si et al, 2000; 基于 Tris-Citric acid 的 TCG 和 TCF 稀释液用于山 羊 (Santiago-Moreno et al, 2008)、牛 (Rasul et al, 2001)、兔 (Moce et al, 2003)和狗 (Yildiz et al, 2000) 的精子冷冻保存; 基于盐和糖的 BWW 和 BTS 稀释 液用于人类 (Martins et al, 2003)和猪 (Yeste et al, 2008) 的精子冷冻保存; 基于 Lactose-egg yolk 的 DM 稀释液可用于食蟹猴 (Li et al, 2006)的精子冷冻 保存, 且可以提供类似于 TTE 液的冷冻保护作用; 基于 Skim milk-Raffinose 的 SR 稀释液被广泛用于 小鼠 (Sztein et al, 2000)精子的冷冻保存。尽管有很 多冷冻稀释液被用于哺乳动物精子的冷冻保存, 但 仅有为数不多的文献比较了几种冷冻稀释液对灵 长 类 动 物 精 子 冷 冻 保 存 的 影 响 (Li et al, 2006;Leverage et al,1972;Chen et al, 1994) (Si et al, 2004;Fermandez-Santos et al, 2005;Fermandez-Santos et al, 2006;Kashiwazaki et al 2006;Farshad et al, 2009)。在前期 的实验中, 通过比较不同浓度的甘油、乙二醇、二 甲基亚砜和丙二醇对树鼩精子冷冻存活率的影响, 我们发现 TTE+0.4 mol/L DMSO 可获得较好的冷 冻保护效果(这部分结果已经投稿)。另外, 胺类, 如 二甲基甲酰胺、甲酰胺、二甲乙酰胺和乙酰胺等也 作为重要的渗透性防冻剂用于哺乳动物精子冷冻 保存, 比较二甲基甲酰胺、甲酰胺和甘油对犬精子 冷冻保存的效率,表明甲酰胺具有类似甘油的冷冻 保护效果 (Futino et al, 2010); 比较 5%二甲基甲酰 胺、5%二甲乙酰胺、5%甲酰胺和 3%甘油对野猪精 子冷冻保存的效率,表明 5%二甲乙酰胺具有最佳 的冷冻保存效果 (Bianchi et al, 2008); 比较甘油、二 甲基亚砜、乳酰胺和乙酰胺对日本兔精子保存存活 率的影...…”