Protium spruceanum conhecido por “breu branco” é uma espécie vegetal medicinal. O estudo teve por objetivo, avaliar o extrato hidroetanólico do exocarpo do fruto maduro de Protium spruceanum quanto aos grupos fitoquímicos e atividades biológicas. Os frutos foram coletados e o extrato produzido por maceração estática em solução hidroetanolica 70%. As análises realizadas foram para organolépticas, físico-químicas quanto ao rendimento de extrato obtido, densidade relativa, pH, índice de refração e giro óptico, e para os ensaios biológicos, o extrato foi testado para ativdade de fotoproteção em UV-Vis, atividade antifúngica sobre Candida e antibacteriana sobre Staphylococcus, Salmonella e Escherichia pelo ensaio em disco (mm). O extrato apresentou coloração castanho claro e aromático. A prospecção fitoquímica qualitativa revelou a presença de ácidos orgânicos, açúcares redutores, fenóis, purinas, catequinas e duplas olefinas. O rendimento foi de 16,99%, densidade relativa de 0,965 g mL-1, pH 5,26, índice de refração 1,3987 nD e giro óptico de -99,8°. Na atividade de fotoproteção, o extrato exibiu atividade no comprimento de ondas UVC. Na atividade antifúngica, foi obtido potencial inibição para C. guilliermondii e C. tropicalis e para antibacteriano inibição para cepas de S. aureus, E. coli, e S. sorovar Enteritidis. O extrato do exocarpo do fruto maduro de Protium spruceanum demonstrou potencial efeito biológico.