Protium spruceanum é uma das 146 espécies do gênero Protium, considerada como medicinal pela população do campo e no meio científico. O objetivo deste estudo foi avaliar a fitoquímica, físico-química e as atividades antioxidantes, hemotóxica e antibacteriana do extrato hidroetanólico da resina de P. spruceanum. Destaca-se que os resultados apresentados neste estudo apresentaram inúmeras classes fitoquímicas com resultados positivos, sólidos solúveis com 1,15%, índice de refração de 1,584, pH de 5,63, densidade relativa de 0,9517 g mL-1 20 °C, CI50 de 275,14 µg mL-1 de DPPH, fenólicos totais de 9,96 mg EAG 100 g-1, e rendimento de 6,61%. Atividade hemolítica positiva, em especial, eficiência na atividade antibacteriana com halos de inibição de 19,13 mm para Staphylococcus aureus, de 14,07 mm para Salmonella typhimurium, e de 17,51 mm para Salmonella enteritidis, e baixa inibição para Escherichia coli de 9,18 mm. O extrato hidroetanólico da resina de Protium spruceanum demonstrou resultados excepcionais como agente antioxidante e antibacteriano.