GENERACIÓN DE RAÍCES TRANSFORMADAS DE AGAVE SALMIANA Otto Y SU COLONIZACIÓN POR GLOMUS INTRARADICES

Abstract

El presente estudio es el primer reporte sobre la inducción de raíces transformadas por Agrobacterium rhizogenes en Agave salmiana Otto, así como del establecimiento de un hongo micorrízico en las mismas. Para lograr lo anterior se inocularon plantas germinadas in vitro con diferentes concentraciones de bacteria y de acetosiringona en varios sitios (hoja, tallo y raíz). El tiempo de cocultivo en oscuridad fue de 6 d. Las raíces transformadas se presentaron a los 25 d después de la inoculación. La mayor eficiencia de transformación resultó de la inoculación al tallo con 1x109 bacterias mL-1 y 200 µM de acetosiringona, condiciones en las que se obtuvo 63 % de raíces transformadas. La naturaleza transgénica de las raíces generadas se verificó mediante un ensayo histoquímico para detectar actividad de GUS y los transgenes se amplificaron en muestras de ADN de raíz a través de PCR. Se detectó actividad de GUS en 80 % de los tejidos probados, mientras que los genes rolB y nptII se amplificaron en 60 % de las muestras de ADN analizadas por PCR. Se demostró la capacidad de Glomus intraradices para colonizar in vitro las raíces transformadas de A. salmiana, con una eficiencia de colonización de 70 %. Se logró la recuperación de esporas hijas, con un promedio de 300 esporas hijas por cultivo, a los 6 meses de iniciada la inoculación.