Hemaglutinina de folhas de mandioca (Manihot esculenta Crantz): purificação parcial e toxicidade

Abstract

RESUMOUm dos componentes da multimistura para suplementação alimentar de populações carentes é a farinha de folhas de mandioca (FFM) que possui elevado conteúdo em proteínas, vitaminas e minerais. Todavia, as folhas de mandioca também apresentam substâncias antinutritivas e/ou tóxicas, como cianeto, polifenóis, nitrato, ácido oxálico, hemaglutinina, saponinas e inibidores de tripsina. Objetivou-se neste trabalho extrair as proteínas da FFM, purificando-as em coluna cromatográfica e determinar sua atividade hemaglutinante e toxicidade. Foram testadas várias estratégias de extração e precipitação das proteínas, sendo que o maior teor protéico e atividade hemaglutinante foi obtido na extração com água destilada na proporção 1:20 (p/v) seguida da precipitação com sulfato de amônio a 80% de saturação. As proteínas precipitadas foram purificadas em coluna Q-Sepharose. Das quatro frações obtidas na purificação (I, II, III e IV), a I e a II apresentaram maiores atividades hemaglutinantes. As mesmas frações foram injetadas via intraperitoneal em camundongos com doses de 2 g (fração I), 3 g (fração II), 54 g (fração III) e 52 g (fração IV) para cada animal com 20g de peso médio, não sendo observadas mortes ou quaisquer efeitos adversos após 120h.Termos para indexação: Folha de mandioca, lectina, purificação, toxidez. ABSTRACTOne of the components of the multimixture to the feed supplementation of low-income populations is cassava leaf flour (FFM), with high content of proteins, vitamins and minerals. However, cassava leaves also present substance regarded as antinutritive and/or toxic, such as cyanide, polyphenols, nitrate, oxalic acid, hemagglutinin, saponins and trypsin inhibitors. The aim of this work was to extract proteins from FFM, purifying them in chromatographic column and determine their hemagglutinating activity and toxicity. A number of strategies of extraction and precipitation of proteins were tested; the highest protein content and hemagglutinating activity were obtained in the extraction with distilled water at the 1:20 ratio (p/v) followed by the precipitation with ammonium sulfate at 80% of saturation. The precipitated proteins were purified in Q-Sepharose Fast Flow column. Out of the four purification fractions (I, II, III e IV), the I and II activities presented higher specific activity. The same fractions were injected intraperitoneal via in mice of 20g weight with doses of 2 g (fraction I), 3 g (fraction II), 54 g (fraction III) and 52 g (fraction IV). No deaths or any adverse effects was observed after 120h.

Resíduos Da Indústria Processadora De Polpas De Frutas: Capacidade Antioxidante E Fatores Antinutricionais

“…Na variedade Paulista os teores encontrados foram: fruto inteiro, 0,62 g.100 -1 ; polpa, 0,66g.100 g -1 ; casca, 0,78g.100 g -1 ; e sementes, 0,35 g.100 g -1 ; em ambas as variedades os mais baixos níveis de saponinas foram encontrados nas sementes. Quanto às hemaglutininas, não foi detectada atividade hemaglutinante em nenhuma das farinhas estudadas, o que corresponde a um resultado favorável para consumo, haja vista que as hemaglutininas podem provocar efeitos degenerativos nas membranas celulares, dificultar a ação de enzimas digestivas e assim afetar a absorção de nutrientes, bem como interferir na eficácia do transporte de oxigênio para o organismo devido à aglutinação de células sanguíneas (PEREIRA et al, 2008;NAVES et al, 2010).…”

Extração da lectina da folha de mandioca (Manihot esculenta Crantz) e o efeito de cátions divalentes na atividade hemaglutinante

“…A proporção de FFM e extrator foi de 1:20 (m/v), de acordo com Pereira (2007). A mistura foi colocada sob agitação mecânica por quatro tempos de 15, 60, 120 e 180 minutos em temperatura ambiente.…”

“…Assim, estudar o potencial da lectina da folha de mandioca poderá agregar valor ao que antes era considerado um subproduto agrícola, além de gerar benefícios econômicos e contribuir para o meio ambiente, uma vez que milhares de toneladas de folhas de mandioca deixariam de ser descartadas, para serem utilizadas como suplemento alimentar e/ou em biotecnologia. Pereira (2007) iniciou os estudos com a lectina de folhas de mandioca (Manihot esculenta Crantz cv. Cacao, aos 12 meses de idade).…”

“…A água destilada com um tempo de extração de 15 minutos apresentou maior AH. Pereira (2007), extraindo as proteínas da FFM (Manihot esculenta Crantz, cv. Cacao, aos 12 meses de idade) com água destilada, por 180 minutos, obteve a maior AH (4 UH), com um rendimento de extração de 0,99 g.100 g -1 .…”