Investigation of tick vectors of Hepatozoon canis in Brazil

Blood samples were collected from 99 domestic dogs from the urban and rural areas of the Lábrea municipality, state of Amazonas, Brazil. Canine serum samples were tested by immunofluorescence assay against Rickettsia spp., which revealed that only 3.0% (1/33) and 7.6% (5/66) of the dogs from urban and rural areas, respectively, reacted positively to at least one Rickettsia species. DNA was extracted from canine blood and tested by a battery of PCR assays targeting protozoa of the genera Babesia and Hepatozoon, and bacteria of the genera Rickettsia and Ehrlichia and family Anaplasmataceae. All samples were negative in the PCR assays targeting the genera Babesia, Hepatozoon, Ehrlichia and Rickettsia. For Anaplasmataceae, 3% (1/33) and 39.4% (26/66) of the urban and rural dogs, respectively, yielded amplicons that generated DNA sequences 100% identical to the corresponding sequence of Wolbachia endosymbiont of Dirofilaria immitis. Because of these results, all canine DNA samples were further tested in a PCR assay targeting filarial nematodes, which was positive for 18.2% (6/33) and 57.6% (38/66) urban and rural dogs, respectively. Filarial-PCR products generated DNA sequences 100% identical to D. immitis. While tick-borne infections were rare in Lábrea, D. immitis infection rates were among the highest reported in South America.Keywords: Dogs, ticks, Rickettsia, Wolbachia, Dirofilaria immitis, Amazon. ResumoAmostras de sangue foram coletadas de 99 cães domésticos de áreas urbana e rural do município de Lábrea, estado do Amazonas. Soros caninos foram testados pela técnica de imunofluorescência indireta contra Rickettsia spp., resultando em apenas 3,0% (1/33) e 7,6% (5/66) de cães soropositivos nas áreas urbana e rural, respectivamente. DNA foi extraído do sangue canino e testado por diferentes protocolos da PCR para detecção de protozoários dos gêneros Babesia e Hepatozoon, e bactérias dos gêneros Rickettsia e Ehrlichia e da família Anaplasmataceae. Todas as amostras foram negativas nos protocolos de PCR para os gêneros Babesia, Hepatozoon, Ehrlichia e Rickettsia. Para Anaplasmataceae, 3% (1/33) e 39,4% (26/66) dos cães de áreas urbana e rural, respectivamente, geraram sequências de DNA 100% idênticas ao endosimbionte Wolbachia de Dirofilaria immitis. Posteriormente, as amostras foram testadas pela PCR para nematódeos filarídeos, resultando em 18,2% (6/33) e 57,6% (38/66) de amostras positivas nas áreas urbana e rural, respectivamente. Os produtos geraram sequências de DNA 100% idênticas a D. immitis. Em contraste com várias outras regiões do Brasil, infecções transmitidas por carrapatos foram raras em Lábrea. Por outro lado, as frequências de infecção por D. immitis estiveram entre as mais altas relatadas na América do Sul.

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Survey of canine tick-borne diseases in Lábrea, Brazilian Amazon: ‘accidental’ findings of Dirofilaria immitis infection

Soares

Camargo

Gennari

et al. 2014

“…R. sanguineus is considered to be the main H. canis vector in the Old World (BANETH et al, 2007), and its presence on dogs has been associated with pathogen infection (SPOLIDORIO et al, 2009). However, until now, there is no report of R. sanguineus naturally or experimentally infected with H. canis in Brazil (FORLANO et al, 2005;SPOLIDORIO et al, 2009;DEMONER et al, 2013). These negative results could be related to the different susceptibilities of R. sanguineus populations to H. canis because it has been shown that the taxon R. sanguineus is represented by at least two different species in Latin America (MORAES-FILHO et al, 2011).…”

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Survey of Ehrlichia canis, Babesia spp. and Hepatozoon spp. in dogs from a semiarid region of Brazil

Rotondano

Almeida

Krawczak

et al. 2015

This study assessed the occurrence of Ehrlichia spp., Babesia spp. and Hepatozoon spp. infections in 100 tick-harboring dogs from a semiarid region of the State of Paraíba, Northeastern Brazil. Blood samples and ticks were collected from the animals, and a questionnaire was submitted to dog owners to obtain general data. Blood samples were used to perform hemogram, direct blood smear and immunological and molecular hemoparasite detection. The 1,151 ticks collected were identified as Rhipicephalus sanguineus; direct smears revealed E. canis-like morulae in the monocytes of 4% (4/100) of the non-vaccinated female dogs, and 34% and 25% of the dogs tested positive for Ehrlichia canis by indirect immunofluorescence assay (IFA) and polymerase chain reaction (PCR), respectively. Blood smear examination revealed Babesia-suggestive merozoites in the erythrocytes of 2% (2/100) of the animals. Babesia vogeli was detected by PCR in ten animals (10%) and was correlated with young age (p = 0.007) and thrombocytopenia (p = 0.01). None of the animals showed Hepatozoon spp. positivity. These results indicate that E. canis is the main tick-borne canine pathogen in the study area and provide the first report of B. vogeli infection in dogs from Paraiba State.Keywords: Ehrlichia, Babesia, Hepatozoon, dogs, Northeastern Brazil. ResumoO presente estudo avaliou a ocorrência de infecção por Ehrlichia spp., Babesia spp. e Hepatozoon spp. em 100 cães, infestados por carrapatos, oriundos de uma região semiárida do Estado da Paraíba, Nordeste do Brasil. Amostras de sangue e de carrapatos foram coletadas dos animais, e um questionário foi submetido aos proprietários dos cães para obter dados gerais. As amostras de sangue foram utilizadas para realização de hemograma, esfregaço sanguíneo e detecção molecular dos hemoparasitos. Os 1.151 carrapatos coletados foram identificados como Rhipicephalus sanguineus; os esfregaços sanguíneos revelaram mórulas sugestivas de E. canis em 4% (4/100) de cães fêmeas não vacinadas, e 34% e 25% dos cães foram positivos para Ehrlichia canis pela imunofluorescência indireta (IFI) e reação em cadeia pela polimerase (PCR), respectivamente. Os esfregaços sanguíneos revelaram merozoítas sugestivas de Babesia em eritrócitos de 2% (2/100) dos animais. Babesia vogeli foi detectada por PCR em dez animais (10%) e foi correlacionada com a idade jovem (p=0,007) e trombocitopenia (p=0,01). Nenhum dos animais apresentou positividade para Hepatozoon spp. Esses resultados indicam que E. canis é o principal patógeno canino transmitido por carrapato, na área estudada, e fornece o primeiro relato de infecção por B. vogeli em cães do Estado da Paraíba.

“…closed related to Hepatozoon americanum has also been molecularly detected in wild canids (CRIADO-FORNELIO et al, 2006;ANDRÉ et al, 2010). R. sanguineus, Amblyomma ovale and Rhipicephalus (Boophilus) microplus are suspected vectors of H. canis in Brazil (FORLANO et al, 2005;MIRANDA et al, 2011;DEMONER et al, 2013).…”

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Study on coinfecting vector-borne pathogens in dogs and ticks in Rio Grande do Norte, Brazil

Gonçalves

Filgueira

Ahid

et al. 2014

Since dogs presenting several vector borne diseases can show none or nonspecific clinical signs depending on the phase of infection, the assessment of the particular agents involved is mandatory. The present study aimed to investigate the presence of Babesia spp., Ehrlichia spp., Anaplasma spp., Hepatozoon spp. ResumoCães que apresentam diversas doenças transmitidas por vetores podem mostrar nenhum ou alguns sinais clínicos inespecíficos. Dependendo da fase da infecção, a confirmação dos agentes envolvidos é necessária. O presente estudo teve como objetivo detectar a presença de Babesia spp., Ehrlichia spp., Anaplasma spp., Hepatozoon spp. e Leishmania spp. em amostras de sangue e carrapatos, coletados em dois cães do Rio Grande do Norte. Esses animais apresentavam sinais clínicos sugestivos de doenças transmitidas por carrapatos, quando foram usadas técnicas moleculares. DNA de E. canis, H. canis e L. infantum foram detectados em amostras de sangue e carrapatos R. sanguineus coletados dos cães. Entre todas as amostras analisadas, duas mostraram a presença de infecções múltiplas por E. canis, H. canis e L. infantum chagasi. Destaca-se a necessidade de um diagnóstico molecular diferencial em cães com sinais clínicos inespecíficos.