Isolamento químico e validação analítica por cromatografia líquida de alta eficiência de quercitrina em Solidago chilensis Meyen (Asteraceae)

Abstract

RESUMO:A espécie Solidago chilensis Meyen, Asteraceae é conhecida como erva-lanceta ou arnica-brasileira, sendo utilizada popularmente como antimicrobiana e para o tratamento de inflamações tópicas. No entanto, estudos fitoquímicos e farmacológicos para as partes aéreas são escassos. Neste trabalho, realizou-se a determinação de flavonoides por espectrofotometria de UV/Vis, prospecção fitoquímica da fração acetato de etila visando o isolamento do constituinte químico majoritário e validação analítica por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). O teor de flavonoides totais foi de 5,42%, representados como hiperosídeo. O fracionamento químico utilizando métodos cromatográficos (cromatografia líquida em coluna gel de sílica; CHCl 3 :EtOH; 8:2 v/v) e espectroscópicos ( 1 H RMN, 13 C RMN e ESI-MS) revelou o isolamento de quercetina-3-O-α-L-ramnosídeo(quercitrina). A sensibilidade e a linearidade (r = 0,999) da validação analítica, utilizando a quercitrina isolada do extrato hidroalcoólico da planta, revelaram um rendimento de 5,29% do analito em relação à droga vegetal. Precisão, recuperação e robustez, além dos valores estabelecidos para os limites de detecção (LOD) e de quantificação (LOQ), poderão ser utilizados como parâmetros de qualidade para extratos à base de S. chilensis. Palavras-chave:Solidago chilensis, quercitrina, validação analítica, CLAE. ABSTRACT: Chemical isolation and analytical validation by high-performance liquid chromatography of quercitrin in Solidago chilensis Meyen (Asteraceae).The speciesSolidago chilensis Meyen Asteraceae, known as "erva-lanceta" or "Brazilian arnica", is popularly used as an antimicrobial and topical treatment for inflammations. However, phytochemical and pharmacological studies of its aerial parts are scarce. In this study, flavonoids were determined by UV/Vis spectrophotometry and phytochemical screening of the ethyl acetate fraction with the goal of isolating the major chemical constituent and analytically validating it through high performance liquid chromatography (HPLC). The total flavonoid content was 5.42%, represented as hyperoside. Chemical fractionation using chromatographic (liquid chromatography in column of silica gel, CHCl3:EtOH, 8:2 v/v) and spectroscopic methods (1H RMN, 13C RMN, and ESI-MS) revealed the isolation of quercetin-3-O-α-L-rhamnoside (quercitrin). The sensitivity and linearity (r = 0.999) using the isolated quercitrin of the hydroalcoholic extract of the plant revealed a yield of 5.29% of analyte in relation to the plant. Precision, recovery, and robustness, as well as values set for the limits of detection (LOD) and quantitation (LOQ) can be used as quality parameters for extracts based on S. chilensis.

Técnicas De Prospecção Fitoquímica E Sua Importância Para O Estudo De Biomoléculas Derivadas De Plantas

“…O homem, por meio da observação, foi capaz de reconhecer as propriedades bioativas das plantas, tanto terapêuticas quanto tóxicas, e com isso gerar conhecimento que foi passado por gerações ao longo do tempo. Assim, são utilizadas até hoje no tratamento e prevenção de enfermidades humanas e animais (CARVALHO, et al, 2014;LIMA et al, 2015;MORAIS et al, 2016;RODRIGUES et al, 2016). 993 Além da utilização de plantas como alternativa terapêutica ser atualmente observada em um número cada vez maior de pessoas no mundo (LUZ et al, 2014), cerca de 25% dos medicamentos contém extratos vegetais em sua composição (LIMA et al, 2015) e um número maior são derivados de moléculas isoladas de drogas vegetais.…”

“…Como exemplos, podem ser citados: doseamento de fenóis e taninos total e teor de flavonoides (RODRIGUES et al, 2015); testes bioquímicos de atividades enzimáticas como a capacidade antioxidante por meio de reações do DPPH (ABE et al, 2014;MORAIS et al, 2016;SILVA et al, 2016); associação a testes in vitro e in vivo para medir a atividade antibacteriana (CARVALHO et al, 2014;HYACIENTH & ALMEIDA, 2015;SOUSA et al, 2015;AQUINO et al, 2016;SILVA et al, 2016), atividade leishmanicida (LIMA et al, 2015), anti-radicalar (SOUSA et al, 2015), toxicidade (HYACIENTH & ALMEIDA, 2015) e atividade citotóxica . Esse tipo de estudo demonstra a ação dos metabólitos encontrados na prospecção por meio de outros testes.…”

“…Já a CLAE é uma técnica mais dispendiosa, pois utiliza colunas com a fase estacionária constituída por partículas finas, entre 3 a 10 µm, de diferentes formatos e densidades, que oferecem maior resistência ao fluxo da fase móvel, o que 1002 necessita de maior pressão para que a eluição ocorra a uma velocidade razoável (SIMÕES et al, 2010). VECHIA et al (2016) verificaram em seu trabalho que a CLAE é eficiente no isolamento e validação de moléculas provenientes de extratos vegetais, e por isso amplamente utilizada, por permitir que dados qualitativos e quantitativos sejam obtidos para amostras de polaridades variadas em uma única eluição. Além disso, é possível analisar por várias formas de detecção e ter a especificidade e o conteúdo de informações por ensaio aumentadas.…”

“…Das plantas originárias da Caatinga, foram analisadas as plantas Cnidoscolus phyllacanthus (MORAIS et al, 2016) e Sideroxylon obtusifolium (AQUINO et al, 2016) por meio dos testes reativos e a planta Opuntia cochenillifera utilizando tanto desses testes quanto da CCD. Tais técnicas foram utilizadas para identificar a classe dos compostos presentes e a CCD foi utilizada na produção do extrato vegetal.…”

“…Também dignos de nota são os estudos com as espécies Pseudoxandra cuspidata (HYACIENTH & ALMEIDA, 2015); Costus spicatus (PAES et al, 2013); Bauhinia forficata (MARQUES et al, 2012); Psychotria colorata e Psychotria hoffmannseggiana (MENDONÇA et al, 2015), analisadas por testes de reação química; e Solidago chilensis (VECHIA et al, 2016), estudada por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE). Esta última teve o composto quercitrina, um flavonoide, isolado.…”