RESUMO -O pré-tratamento da biomassa vegetal visando-se ao aumento de sua digestibilidade enzimática está entre os temas de pesquisa de maior interesse mundial. Para este fim, o uso de condições amenas de processo pode resultar em redução em seu custo global. Neste trabalho, avaliou-se o uso do glicerol em meio ácido para o pré-tratamento do bagaço de cana-de-açúcar sob pressão atmosférica. Experimentos foram realizados em diferentes temperaturas empregando-se meio reacional contendo 5% m/v de bagaço e 0,5% m/v de H 2 SO 4 , além de solução de glicerol 95%, sendo também realizados testes em autoclave e meio isento de glicerol. O material pré-tratado foi submetido à hidrólise enzimática empregando preparado comercial de celulase, a 50°C por 24h. Os resultados obtidos demonstraram que a hidrólise da celulose variou de 11% (material não tratado) até 41,7%, valor observado com o material pré-tratado a 121°C em meio contendo glicerol. Em todos os casos, observou-se que o pré-tratamento resultou em valores médios de hidrólise enzimática superiores aos obtidos com o material não tratado. Esta superioridade foi mais notória a 121°C, em especial quando glicerol foi empregado no meio. Nesta temperatura, o uso de glicerol resultou em um percentual de celulose hidrolisada de cerca de 40% em comparação a 27% de hidrólise empregando-se meio isento deste composto.