MICROPROPAGATION OF <i>Aspidosperma polyneuron</i> Müll. Arg. FROM IN VITRO GERMINATED SEEDLINGS

Abstract

In this study, an efficient method for regenerating plants from nodal cultures of seedlings was developed for Aspidosperma polyneuron. Mature seeds were surface-sterilized and embryos were germinated in Woody Plant Medium (WPM). Epicotyl and hypocotyl nodal segments, excised from 3-week-old in vitro-grown seedlings, were cultured in WPM medium supplemented with 6-benzyladenine (BA) (2.5, 5.0, and 10 µM), alone or combined with indole-3-butyric acid (IBA) or α-naphthaleneacetic acid (NAA) (0.5 µM) for culture initiation and three subcultures. For root induction, IBA (2.5, 5.0, and 10 mM) pulse treatments (15 minutes) were initially applied, followed by transfer to growth regulator-free WPM for five weeks. Regenerated plants were first transplanted to trays containing soil and Plantmax® substrate (3:1) and later to polyethylene bags for acclimatization in a greenhouse. Hypocotyl explants exhibited superior shoot regeneration rate and rooting percentages compared with those of epicotyl explants. The highest numbers of shoots per explant (7−8) were obtained at the third subculture when using the culture medium supplemented with 10 µM BA. When combined with BA, the addition of 0.5 µM IBA or NAA did not affect the regeneration of shoots. An IBA pulse treatment of 5−10 mM for 15 minutes induced 60% of rooting. The regenerated plants were acclimatized and successfully established in a greenhouse, with a 90% survival rate observed after three months. Based on the results of this study, the micropropagation of Aspidosperma polyneuron from in vitro seedlings is feasible and could be a useful tool for the conservation and propagation of this important endangered species. Keywords: forestry species; juvenile explant; multiplication; rooting. RESUMOFoi desenvolvido um método eficiente de regeneração de plantas para Aspidosperma polyneuron a partir de culturas nodais de plântulas. Sementes maduras foram desinfestadas e os embriões germinaram em meio de cultura Woody Plant Medium (WPM). Segmentos nodais do epicótilo e hipocótilo retirados de plântulas de três semanas crescendo in vitro foram cultivados em meio WPM, suplementado com 6-benziladenina (BA) (2,5; 5,0 e 10 µM), isolado ou combinado com ácido indol-3-butírico (AIB) ou ácido α-naftalenoacético (ANA) (0,5 µM) durante o cultivo inicial e três subcultivos. Para indução de raízes, inicialmente, foram testados tratamentos-pulso de AIB (2,5; 5,0 ou 10 mM) por 15 minutos, seguidos de transferência para meio WPM, sem regulador de crescimento por cinco semanas. Plantas regeneradas foram transplantadas Ribas, L. L. F. et al. 392 para bandejas contendo solo e substrato Plantmax® (3:1) e depois transferidas para sacos plásticos para aclimatização em casa de vegetação. Os explantes do hipocótilo apresentaram resultados superiores de regeneração de brotações e enraizamento, quando comparados com os do epicótilo. Os maiores números de brotações por explante (7-8) foram obtidos em meios de cultura, suplementados com 10 µM de BA, no terceiro subcultivo. A adição de 0,5 µM de AI...

Propagação in vitro de <i>Colubrina glandulosa</i> Perkins: espécie nativa com potencial para programas de reflorestamento

“…Além disso, o NaClO pode auxiliar ou promover a quebra de dormência das sementes devido à capacidade de estimular a atividade da α-amilase, favorecendo a germinação (KANEKO; MOROHASHI, 2003). Em trabalhos anteriores, o NaClO também foi eficiente no estabelecimento de sementes in vitro de outras espécies florestais, como a Amburana cearenses (umburana-de-cheiro) (CAMPOS et al, 2013), Eugenia uniflora (pitanga) (SILVA et al, 2014) e Aspidosperma polyneuron (peroba-rosa) (RIBAS et al, 2017). No entanto, o Comet ® é um fungicida que proporciona excelente ação protetiva, devido a sua atuação na inibição da germinação dos esporos (COLOMBARI et al, 2015).…”

“…Um balanço adequado entre citocinina e auxina e as concentrações endógenas nos tecidos vegetais estabelecem um controle eficiente na morfogênese e influenciam na atividade meristemática das gemas axilares (MAGYAR-TÁBORI et al, 2010). Como foi observado no presente trabalho, o uso de auxinas também não induziu o aumento de taxas de regeneração das brotações de Aspidosperma polyneuron (peroba-rosa), sendo que a adição de 0,5 µM de AIB ou ANA combinada com BAP não apresentou diferenças em relação aos tratamentos sem a adição de AIB ou ANA (RIBAS et al, 2017).…”

“…Além disso, a micropropagação está entre as principais técnicas biotecnológicas empregadas na multiplicação de espécies vegetais, e com aplicações práticas comprovadas na micropropagação de espécies florestais madeireiras (PÉREZ FLORES; AGUILAR VEGA; ROCA TRIPEPI, 2012;CAMPOS et al, 2013;SILVA et al, 2014;SILVEIRA et al, 2016;RIBAS et al, 2017;NAAZ et al, 2019). Por meio desta é possível ainda realizar a conservação de germoplasma in vitro, a redução do tempo de programas de melhoramento genético, a produção clonal massiva em curto espaço de tempo e a obtenção de plantas livres de pragas e patógenos (PIJUT et al, 2012).…”

“…Nesse sentido, pode-se observar que o aumento da concentração do AIB (4 µM) induziu a formação de raízes mesmo com a presença de carvão ativado, reforçando a hipótese da adsorção dos componentes do meio de cultura.A suplementação do carvão ativado ao meio de cultura também não se mostrou eficiente para o enraizamento de Pyrus communis (pereira) como descrito por Erig, negativo no enraizamento. Por outro lado, a aplicação exógena de auxina fezse necessária para a indução de raízes em Amburana cearenses (umburana-de-cheiro)(CAMPOS et al, 2013) e Aspidosperma polyneuron (peroba-rosa)(RIBAS et al, 2017).…”

Drought stress effects on germination and reserve degradation of Aspidosperma polyneuron seeds

“…Due to deforestation and overexploitation, A. polyneuron is listed in the IUCN red list of threatened species (IUCN, 1998). Its natural restoration is also hampered by low seasonal seed production, slow growth and irregular germination rates (Ribas et al, 2017).…”