O presente trabalho teve como objetivo o estabelecimento de um protocolo de regeneração in vitro de mudas de Aspidosperma polyneuron (peroba-rosa), a partir de segmentos nodais de material juvenil. Brotações apicais de mudas de dois anos de idade foram desinfestadas com 0,25% de hipoclorito de sódio ou 0,05% de cloreto de mercúrio, durante 10 min, visando ao estabelecimento de culturas assépticas. A indução de brotações múltiplas foi realizada em meio de cultura WPM, suplementado com BAP, ZEA ou CIN (2,2-8,8 miM), no cultivo inicial e nos dois subcultivos subseqüentes. Para indução de brotações alongadas foram testadas as combinações de fitorreguladores: 2,25 miM de BAP, ZEA ou CIN, associadas com 1,25 miM de AIB. A indução de raízes foi avaliada com tratamentos em soluções de AIB (2,5-10 mM), durante 5 ou 15 min. As mudas enraizadas foram transplantadas para casa de vegetação. A desinfestação das brotações apicais foi eficiente com 0,25% de NaOCl ou 0,05% de HgCl2, durante 10 min, obtendo-se 72,89 e 84,10% de sobrevivência, respectivamente. As maiores taxas médias de regeneração de brotações axilares (4 a 5) foram obtidas em meio de cultura suplementado com ZEA ou BAP (4,4-8,8 miM), após o segundo subcultivo. Concentrações mais reduzidas de BAP ou ZEA (2,25 miM) e 1,25 miM de AIB proporcionaram, em média, três brotações mais alongadas (1,5-2,5 cm de comprimento). Tratamentos com soluções de 10 mM de AIB, durante 15 min, foram eficientes na indução de raízes (80%), e as mudas transplantadas apresentaram taxas de sobrevivência superiores a 90% em casa de vegetação.

A protocol is described for the in vitro propagation of Abies amabilis (Dougl.) Forbes. Over 60% of the cotyledonary explants from 5-day-old cotyledons formed shoots when cultured for 7 days on Schenk and Hildebrandt's (SH) medium containing 10 micro M N(6)-benzyladenine (BA) followed by another 7 days on SH medium containing 10 micro M each of BA and zeatin. Shoot multiplication was unsuccessful. Seventeen percent rooting was obtained after pulsing for 4 h in 1 mM indole-3-butyric acid and planting pulsed shoots in 1/1 (v/v) perlite/vermiculite. Cell clusters (promeristemoids) of five to seven cells were observed on the cotyledonary explants after 7 days of culture in the presence of cytokinin. These cells developed further into meristematic domes and apical meristems. In the absence of cytokinin, stomata and resin canals reached maturity, whereas cells within the cortex became vacuolated and developed into palisade and spongy mesophyll.

O presente trabalho objetivou estabelecer um protocolo para obtenção de culturas assépticas de Aspidosperma polyneuron visando à regeneração in vitro de mudas dessa espécie. Brotações apicais de mudas de dois anos de idade foram coletadas em casa de vegetação e desinfestadas com hipoclorito de sódio (NaOCl) ou cloreto de mercúrio (HgCl2) visando ao estabelecimento de culturas assépticas. Os tratamentos testados com NaOCl foram: solução 0,125 ou 0,25%, durante cinco ou dez minutos e com HgCl2: 0,025; 0,05 ou 0,1%, durante cinco ou dez minutos e em todas as estações do ano. As avaliações das percentagens de necrose, contaminação fúngica, contaminação bacteriana e de sobrevivência foram feitas após três semanas. Os resultados revelaram que o tratamento com solução de NaOCl a 0,25%, durante 10 minutos, resultou em 70% de sobrevivência para brotações apicais, independente da época do ano (verão e outono). O HgCl2 foi mais eficiente que o NaOCl na desinfestação de brotações apicais de peroba-rosa, sendo recomendado o tratamento de 0,05% de HgCl2, durante 10 minutos (84,10% de sobrevivência). Em todas as estações do ano, foram estabelecidas culturas assépticas, contudo, os melhores resultados foram obtidos na primavera e verão.

No abstract

In this study, an efficient method for regenerating plants from nodal cultures of seedlings was developed for Aspidosperma polyneuron. Mature seeds were surface-sterilized and embryos were germinated in Woody Plant Medium (WPM). Epicotyl and hypocotyl nodal segments, excised from 3-week-old in vitro-grown seedlings, were cultured in WPM medium supplemented with 6-benzyladenine (BA) (2.5, 5.0, and 10 µM), alone or combined with indole-3-butyric acid (IBA) or α-naphthaleneacetic acid (NAA) (0.5 µM) for culture initiation and three subcultures. For root induction, IBA (2.5, 5.0, and 10 mM) pulse treatments (15 minutes) were initially applied, followed by transfer to growth regulator-free WPM for five weeks. Regenerated plants were first transplanted to trays containing soil and Plantmax® substrate (3:1) and later to polyethylene bags for acclimatization in a greenhouse. Hypocotyl explants exhibited superior shoot regeneration rate and rooting percentages compared with those of epicotyl explants. The highest numbers of shoots per explant (7−8) were obtained at the third subculture when using the culture medium supplemented with 10 µM BA. When combined with BA, the addition of 0.5 µM IBA or NAA did not affect the regeneration of shoots. An IBA pulse treatment of 5−10 mM for 15 minutes induced 60% of rooting. The regenerated plants were acclimatized and successfully established in a greenhouse, with a 90% survival rate observed after three months. Based on the results of this study, the micropropagation of Aspidosperma polyneuron from in vitro seedlings is feasible and could be a useful tool for the conservation and propagation of this important endangered species. Keywords: forestry species; juvenile explant; multiplication; rooting. RESUMOFoi desenvolvido um método eficiente de regeneração de plantas para Aspidosperma polyneuron a partir de culturas nodais de plântulas. Sementes maduras foram desinfestadas e os embriões germinaram em meio de cultura Woody Plant Medium (WPM). Segmentos nodais do epicótilo e hipocótilo retirados de plântulas de três semanas crescendo in vitro foram cultivados em meio WPM, suplementado com 6-benziladenina (BA) (2,5; 5,0 e 10 µM), isolado ou combinado com ácido indol-3-butírico (AIB) ou ácido α-naftalenoacético (ANA) (0,5 µM) durante o cultivo inicial e três subcultivos. Para indução de raízes, inicialmente, foram testados tratamentos-pulso de AIB (2,5; 5,0 ou 10 mM) por 15 minutos, seguidos de transferência para meio WPM, sem regulador de crescimento por cinco semanas. Plantas regeneradas foram transplantadas Ribas, L. L. F. et al. 392 para bandejas contendo solo e substrato Plantmax® (3:1) e depois transferidas para sacos plásticos para aclimatização em casa de vegetação. Os explantes do hipocótilo apresentaram resultados superiores de regeneração de brotações e enraizamento, quando comparados com os do epicótilo. Os maiores números de brotações por explante (7-8) foram obtidos em meios de cultura, suplementados com 10 µM de BA, no terceiro subcultivo. A adição de 0,5 µM de AI...