Bakteri halofilik merupakan bakteri yang membutuhkan kadar garam tinggi untuk hidup, sedangkan bakteri halotoleran merupakan bakteri yang mampu hidup dengan atau tanpa garam. Bakteri halofilik dan halotoleran memiliki potensi untuk dimanfaatkan dalam bioteknologi. Tambak garam Universitas Trunojoyo Madura (UTM) yang terletak di Kabupaten Pamekasan dapat dijadikan sumber penelitian eksistensi bakteri halofilik dan halotoleran. Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi bakteri halofilik moderat dan halotoleran di air baku tambak garam UTM, serta mengetahui karakteristik morfologi dan biokimia. Empat isolat bakteri halofilik diperoleh dengan kode AB.1.2, AB.2.4, AB.2.5, dan AB.3.6, dan dua isolat bakteri halotoleran dengan kode AB.1.1 dan AB.2.3.Bentuk sel keseluruhan isolat berupa kokus dan isolat bakteri didominasi oleh Gram negatif. Tiga isolat termasuk kelompok bakteri aerob berdasarkan uji katalase dan oksidase. Isolat bakteri halotoleran dengan kode AB.1.1 dan A.B.2.3 mampu menghasilkan enzim sitrat, sedangkan isolat halofilik AB1.2, AB.2.5 dan AB.3.6 mampu menghasilkan enzim urease. Keseluruhan isolat mampu memfermentasi sukrosa, glukosa, manitol dan maltosa. Hasil penelitian ini diharapkan dapat dijadikan sebagai informasi awal untuk mendeskripsikan karakteristik bakteri halofilik dan halotoleran yang diisolasi dari air baku tambak garam UTM.