Non-plasmin fibrinolysis with immobilized subtilisins

Abstract

Введение. В современной клинической медицине технология фармакологического тромболизиса в подавляющем большинстве случаев реализуется посредством применения активаторов плазминогена. Плазминовый фибринолиз ограничен ввиду ингибирования плазмина продуктами деградации фибрина. Фибринолиз субтилизинами может рассматриваться как альтернативная технология фармакологического тромболизиса. Цель исследования: изучить особенности фибринолитического действия иммобилизированных субтилизинов in vitro. Материалы и методы. В соответствии с задачами исследования было проведено 5 серий экспериментов: со специфичным к плазмину хромогенным субстратом с очищенным препаратом фибринмономера с оценкой наличия прямой фибринолитической активности с оценкой торможения полимеризации (самосборки) фибринмономера со сравнением тромболитической активности препарата иммобилизированных субтилизинов по отношению к аналогичной активности плазмина и трипсина in vitro. Результаты. Проведенные исследования продемонстрировали высокую фибринолитическую активность иммобилизированных субтилизинов. Показано, что действие последних на фибрин реализуется напрямую и с четким дозозависимым эффектом. Заключение. Фибринолитическая активность субтилизинов представляет собой феномен экзогенного неплазминового фибринолиза. Introduction. Pharmacological thrombolysis is traditionally using plasminogen activators. Followed fibrinolysis can become limited in some time due to plasmin depletion and its inhibition by fibrin/fibrinogen degradation products. We assumed the subtilisin can perform alternative mode of fibrinolysis. Aim: to study features of fibrinolytic activity of immobilized subtilisins in vitro. Materials and methods. Subtilisin fibrinolytic activity, and fibrinmonomer selfassembling deceleration, and comparing thrombolytic activities immobilized subtilisins, plasmin and trypsin each to other were examined with five in vitro experiments using plasminspecific chromogenic substrates and purified fibrinmonomer. Results. Immobilized subtilisins have shown high direct fibrinolytic activity which seems having dosedependent manner. Conclusion. Exogenous immobilized subtilisins are plasmin/plasminogen bypassing agents. Their proteolytic action at fibrin might be considered as a phenomenon of nonplasmin fibrinolysis.