Novel side chain modified Δ8(14)-15-ketosterols

Regulation of cholesterol biosynthesis and metabolismin Hep G2 cells by δ8(14)-15-ketoergostane derivatives

“…Ранее нами было показано, что кетостерины (I), (II), (III), (IV) эффективно ингибируют биосинтез холестерина в клетках Hep G2 при краткосрочной инкубации [14,16]. Поскольку в клетках Hep G2 15-кетостерин (I) подавляет биосинтез холестерина, ингибируя активность HMG CoA редуктазы, но не влияет на уровень соответствующей мРНК, а 15-кетопроизводные эргостана (II), (III), (IV) снижают и активность фермента и уровень соответствующей мРНК, нам показалось интересным сравнить эффекты кетостеринов (I) и (II) на скорость биосинтеза в клетках Hep G2, проводя инкубацию клеток с этими соединениями в разных условиях.…”

“…Очевидно, 15-кетопроизводное эргостана (II), более устойчивое к метаболической деградации, а также подавляющее биосинтез холестерина на уровне экспрессии гена HMG-CoA редуктазы, является более эффективным ингибитором биосинтеза холестерина в условиях продолжительной инкубации, чем 15-кетопроизводное холестана (I). D8(14)-15-Кетопроизводные эргостана, содержащие 22,23-эпоксигруппу (III) и (IV), обладают заметной цитотоксичностью [14,15], поэтому аналогичных экспериментов с соединениями (III) и (IV), требующих их высоких концентраций, мы не проводили.…”

“…С целью создания новых аналогов 15-кетостерина, обладающих большей устойчивостью к метаболической деградации в клетках печени, нами ранее был осуществлен синтез серии D8(14)-15-кетопроизводных эргостана [12][13][14][15]. Среди новых D8(14)-15-кетопроизводых эргостана найдены соединения, ингибирующие биосинтез холестерина в клетках Hep G2 при краткосрочной инкубации эффективнее, чем 15-кетостерин [14,16,17], снижающие уровень биосинтеза холестерина в присутствии сывороточных липидов [17], регулирующие активность ацил-КоA-холестерин-ацилтрансферазы [18] и стимулирующие окисление холестерина в клетках Hep G2 [17].…”

“…Среди новых D8(14)-15-кетопроизводых эргостана найдены соединения, ингибирующие биосинтез холестерина в клетках Hep G2 при краткосрочной инкубации эффективнее, чем 15-кетостерин [14,16,17], снижающие уровень биосинтеза холестерина в присутствии сывороточных липидов [17], регулирующие активность ацил-КоA-холестерин-ацилтрансферазы [18] и стимулирующие окисление холестерина в клетках Hep G2 [17]. Гидроксилирование боковой цепи 3b-гидрокси-5a-эргоста-8(14),22-диен-15-она (II) в реакции, катализируемой стерин-27-гидроксилазой СYP27A1 проходило в 16 раз медленнее, чем гидроксилирование 15-кетостерина (I), причём главным метаболитом кетостерина (II) оказался продукт гидроксилирования по С28 [19].…”

“…Синтез соединений (II-IV) был описан ранее [12][13][14][15]; 5a-холест-8(14)-ен-15-он-3b-ол (15-кетостерин, I) синтезирован по методу [20] с незначительными модификациями; ЛПДС получена из плазмы крови здорового донора [21]. Холестерин, холестерилолеат, триолеин, PMSF, EDTA, трис-(гидроксиметиламино)-метан (трис), этидий бромид, PBS, додецилсульфат Na, детергенты тритон Х-100 и NP 40, дезоксинуклеотид-5¢-трифосфаты и РНК-аза А получены от фирмы "Sigma"; oлигонуклеотиды, используемые в качестве праймеров ПЦР, от АОО "Cинтол"; AMV-oбратная транскриптаза, Taq-ДНК-полимераза от фирмы "Promega"; материалы для хроматографии от фирмы "Merck"; [1-14 C]AcONa от фирмы "Amersham"; культуральный пластик от "Greiner", "Costar" и "Corning", культуральные среды и FCS от "Gibco BRL" и "HyClone".…”