Orientações para o diagnóstico de influenza em suínos

Abstract

Este trabalho descreve a colheita adequada de amostras, as técnicas/procedimentos disponíveis para o diagnóstico de influenza A em suínos, assim como os resultados e suas respectivas interpretações, para auxiliar médicos veterinários de campo na identificação dessa doença. Em suínos vivos, as amostras adequadas são: secreção nasal, fluido oral e sangue (soro). Para suínos mortos, colher preferencialmente amostras de pulmão com consolidação cranioventral. Secreção nasal e fragmentos de pulmão refrigerado são utilizados para detectar partícula viral viável (isolamento viral - IV) ou ácido nucleico viral (RT-PCR convencional e RT-PCR em tempo real). As amostras não devem ser congeladas, pois o vírus é inativado a -20°C. A caracterização molecular dos isolados é feita pela análise filogenética obtida pelo sequenciamento de DNA. O soro é utilizado para a detecção de anticorpos (Acs) por meio do teste da inibição da hemaglutinação e ELISA. O fluido oral pode ser utilizado para detecção de anticorpo (ELISA) ou de vírus. Fragmentos de pulmão fixados em formol a 10% são examinados microscopicamente para identificar pneumonia broncointersticial e para detecção de antígeno viral pela imuno-histoquímica (IHQ). Para o sucesso do diagnóstico, as amostras devem ser colhidas de suínos que estão preferencialmente na fase aguda da doença, para aumentar as chances de detecção viral. As melhores opções para o diagnóstico de influenza A em suínos vivos são RT-PCR e isolamento viral de amostras de swab nasal ou fluido oral. Pulmão para análise por RT-PCR, isolamento viral ou IHQ é a amostra de escolha em suínos mortos. Testes sorológicos têm valor diagnóstico limitado e são utilizados apenas para determinar o estado imune do rebanho, não indicando doença clínica, pois os Acs são detectados 7-10 dias pós-infecção (fase subaguda). O diagnóstico de influenza é importante para avaliar o envolvimento desse agente no complexo de doença respiratória suína. Além disso, o isolamento do vírus influenza é essencial para o monitoramento dos principais subtipos circulantes em uma determinada região ou país, assim como para a detecção de novos rearranjos virais, já que influenza é considerada uma zoonose.

Infectious diseases dynamics in growing/finishing pigs in Southern Brazil (2005-2016)

“…Porcine circovirus type 2 associated disease (PCV-SD) is one of the main conditions affecting swine health (Segalés 2012), with mortality indexes ranging from 4 to 20% (Segalés et al 2005, Segalés 2012. Besides this condition, porcine respiratory disease complex (PRDC) causes substantial sanitary impacts in swine industry (Schaefer et al 2013), with a myriad of viral and bacterial pathogens involved. Primary infectious agents, which are able to induce severe respiratory/lung lesions, are included among these causes, as well as secondary/opportunistic infectious agents, which are mainly related to noninfectious cofactors at the swine farms (Opriessnig et al 2011).…”

“…Primary infectious agents, which are able to induce severe respiratory/lung lesions, are included among these causes, as well as secondary/opportunistic infectious agents, which are mainly related to noninfectious cofactors at the swine farms (Opriessnig et al 2011). Among these, swine influenza A, Mycoplasma hyopneumoniae, Actinobacillus pleuropneumoniae, Glaesserella (Haemophilus) parasuis, and Pasteurella multocida are the main agents involved (Opriessnig et al 2011, Schaefer et al 2013. Nevertheless, digestive system diseases are also highlighted at this phase, with Lawsonia spp.…”

Infecção pelo vírus influenza A em suínos no sul de Moçambique

“…Os principais diagnósticos diferenciais para este padrão de lesão incluem a infecção pelo VIA, Mycoplasma hyopneumoniae e PCV2 associado à Pasteurella multocida (Fraile et al 2010, Gauger et al 2012. O aspecto macroscópico típico de pneumonia por influenza em suínos é de áreas vermelhas, ligeiramente deprimidas (atelectasia) e firmes (consolidação), afetando áreas extensas da região cranioventral do pulmão, podendo se estender às áreas caudais em lóbulos isolados, dando o aspecto de "tabuleiro de xadrez" (Pereda et al 2010, Schaefer et al 2013. No presente trabalho, este padrão de lesão foi observado em vários pulmões, pelo que, a confirmação da infecção pelo VIA foi feito através da visualização de antígenos virais associados a lesão pulmonar (Van Reeth et al 2012, Schaefer et al 2013.…”

“…A doença acomete suínos de qualquer idade, causa alta morbidade, porém, baixa taxa de mortalidade (Van Reeth et al 2012). O diagnóstico presuntivo de IS pode ser obtido com base nos sinais clínicos e lesões macroscópicas e histológicas características da infecção pelo vírus, contudo, o diagnóstico definitivo é baseado no isolamento viral, detecção de antígenos e/ou material genético do vírus (Van Reeth et al 2012, Schaefer et al 2013.…”

INFLUÊNCIA DAS CONDIÇÕES DE ARMAZENAMENTO DO VÍRUS INFLUENZA NA DETECÇÃO POR RT-qPCR E ISOLAMENTO VIRAL

“…A obtenção do isolado viral permite a realização de estudos sobre diversidade genética viral, patogenia, caracterização antigênica e produção de candidatos vacinais (9,13) . Porém, para o sucesso do isolamento viral, é primordial que o vírus presente na amostra esteja viável (13,14) e, neste caso, a amostra de escolha é a secreção nasal colhida de suínos durante a fase aguda da infecção (1,15) .…”