Otimização e validação de método para determinação de ácidos orgânicos em vinhos por cromatografia líquida de alta eficiência

Abstract

Recebido em 31/7/09; aceito em 13/1/10; publicado na web em 23/4/10 OPTIMIZATION AND VALIDATION METHOD FOR ORGANIC ACID DETERMINATION IN WINES BY HIGH PERFORMANCE LIQUID CROMATOGRAPHY. The organic acids (tartaric, malic, citric, lactic and succinic) are de main components responsible for the acidity in the wine. This method for simultaneous determination of organic acids and interfering peaks in wines can be achieved in 16 min. The sample preceded by a dilution and filtration step. The chromatographic separation required one reversed phase column, isocratic mobile phase (acetonitrila, formic acid in water) and detection wavelength was set at 212 nm. The validation confirmed good repeatability, recovery and application in red and white wines.Keywords: organic acids; wines; HPLC UV/Vis. INTRODUÇÃOOs ácidos orgânicos ocorrem naturalmente nos alimentos como resultado de processos metabólicos, bioquímicos, hidrólises e crescimento bacteriano. Nos vinhos, estes ácidos, provenientes da uva (tartárico, málico e cítrico) e dos processos de fermentação alcoólica e malolática (lático e succínico), Figura 1, contribuem com a cor, aroma, gosto, características e equilíbrio gustativo e para a estabilidade microbiológica e química. [1][2][3][4][5][6][7] Dentre eles, os principais são os ácidos tartárico, málico e cítrico. O ácido tartárico da uva é o isômero L(+), sendo a videira um dos poucos vegetais onde este ácido está presente em quantidades elevadas. O isômero L(-) do ácido málico, encontrado nas folhas e frutos, é um dos mais difundidos na natureza e possui pouca resistência à oxidação, enquanto seu precursor, o ácido cítrico, está presente nas raízes. 6,7 O ácido lático, produzido durante a fermentação malolática, confere suavidade gustativa, e o ácido succínico é um subproduto da fermentação alcoólica. 4A uva é responsável por mais de 95% dos atributos percebidos no vinho. Seus ácidos orgânicos apresentam, entretanto, variações nas concentrações na dependência da variedade, grau de maturação do fruto, disponibilidade de água e temperatura -decorrente da exposição ao sol. Apesar desses compostos serem mais resistentes do que outros componentes do vinho, como pigmentos e aromáticos, apresentam mudanças no seu teor em função dos processos tecnológicos de vinificação -maceração, maceração pelicular -e envelhecimento. 2,4,5 No vinho, a acidez pode ser determinada através da acidez real (expressa pelo pH), acidez titulável e concentração individual de cada ácido. O pH depende, principalmente, do tipo e concentração dos ácidos orgânicos, além da concentração de cátions, especialmente de potássio (K + ), que precipitam o ácido tartárico na forma de sal insolúvel de bitartarato de potássio. [8][9][10] Dentre as várias técnicas usadas na identificação e quantificação dos ácidos orgânicos em vinhos, podemos citar espectrofotometria, eletroforese capilar e cromatografia.2,4,6 Entretanto, a cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) é a mais usada na identificação individual destes compostos, devido a sua simplicidade, precis...

Development and optimization of a HPLC-RI method for the determination of major sugars in apple juice and evaluation of the effect of the ripening stage

“…Lima et al (2010) found repeatability values below the maximum acceptable limits for the validation of chromatographic methods. Likewise, the Brazilian legislation that deals with the validation of analytical and bioanalytical methods establishes that CV% values less than 5 are acceptable (Agência Nacional de Vigilância Sanitária, 2003).…”

“…Due to its simplicity, accuracy, and ease of sample preparation (involving only dilution and filtration stages as pre-treatment of the sample), high performance liquid chromatography (HPLC) has become popular because it provides a rapid quantitative separation of the main sugars in fruit juices (Chinnici et al, 2005;Lima et al, 2010).…”

“…Among the components determined using HPLC are carbohydrates (Chávez-Servín et al, 2004;Muir et al, 2009), organic acids (Chinnici et al, 2005Lima et al, 2010), lipids (Puoci et al, 2008), vitamins (Speek et al, 1986;Rodriguez et al, 2012), colorants (Vidotti, et al, 2006;Ma et al, 2006), amino acids and peptides (Zhang et al, 2010;Garai-Ibade et al, 2012), mycotoxins (Kawashima & Soares,maintained at 80 °C and the detector at 50 °C. Sample detection was performed by comparing retention times standards.…”

Quality evaluation of red wines produced from the Isabella and Ives cultivar (Vitis labrusca): physicochemical parameters, phenolic composition and antioxidant activity

“…Malic acid is considered a weak acid and is poorly resistant to oxidation and high temperatures (Kliewer et al, 1967). Lactic acid is formed during malolactic fermentation, with resulting concentrations ranging from 1 to 3 g.L -1 (Lima et al, 2010).…”

“…Acidity defines the structure and balance of wine; it is dependent on the concentration of acids such as tartaric and malic acids and to a lesser extent on the concentration of lactic and acetic acid (Lima et al, 2010). Rizzon et al (2000) reported that the skin of the Isabella grape yields a higher concentration of organic acids than that of Vitis vinifera cultivars, possibly due to release of the skin's organic acids during maceration.…”