Recebido em 16/9/09; aceito em 30/11/09; publicado na web em 8/4/10 POSSIBILITIES AND LIMITATIONS OF USING TEMPERATURE IN REVERSED PHASE LIQUID CHROMATOGRAPHY. High-temperature liquid chromatography (HTLC) is a technique that presents a series of advantages in liquid phase separations, such as: reduced analysis time, reduced pressure drop, reduced asymmetry factors, modified retentions, controlled selectivities, better efficiencies and improved detectivities, as well as permitting green chromatography. The practical limitations that relate to instrumentation and to stationary phase instability are being resolved and this technique is now ready to be applied for routine determinations.Keywords: high temperature liquid chromatography; stationary phase stability; green chromatography.
INTRODUÇÃOO termo alta temperatura em cromatografia líquida (High Temperature Liquid Chromatography, HTLC) se refere ao uso de temperaturas entre 40 a 200 o C. O uso da temperatura como variável em cromatografia líquida é recente, embora Antia e Horvath 1 tenham descrito seu uso em 1988. A principal vantagem desta técnica é a redução no tempo de análise, característica que é de grande interesse prático para os usuários de cromatografia. Mas até o momento, esta técnica reside quase exclusivamente no meio acadêmico por causa de algumas limitações, como a falta de instrumentação específica para tal fim e a instabilidade das fases estacionárias. Desta forma, esta revisão se dedica à discussão das vantagens e limitações desta técnica, bem como os avanços recentes quanto à instrumentação e fases estacionárias, os quais devem impulsionar a migração desta técnica para o meio industrial.
ASPECTOS TEÓRICOS
Influência da temperatura sobre a pressãoA pressão gerada pela passagem de fase móvel (FM) por uma coluna pode ser descrita pela equação de Kozeny-Carman:2,3 ΔP = (ηFL)/(K 0 πr 2 dp 2 ), onde K 0 é a permeabilidade específica, η é a viscosidade da FM, F é a vazão da FM, r é o raio interno da coluna e dp é o diâmetro médio das partículas da fase estacionária (FE) que recheiam a coluna. A viscosidade decresce exponencialmente em função da temperatura, 2,3 assim, o aumento da temperatura permite: a utilização de maiores vazões; o emprego de partículas com menores diâmetros; a utilização de colunas com maior comprimento ou conectadas em série.Um exemplo de como o aumento da temperatura permite o uso de maiores vazões é o trabalho de Yang et al.2 onde uma coluna ZirChrom-PS (50 x 4,6 mm, dp 2,5 μm) utilizada a 25 o C e com FM acetonitrila:água, 25:75 v/v, a uma vazão de 2 mL/min gera uma pressão de 400 bar, alcançando o limite máximo de pressão de um sistema convencional de cromatografia líquida de alta eficiência (High Performance Liquid Chromatography, HPLC). Quando a temperatura é elevada a 150 o C, a pressão é reduzida a 60 bar, permitindo o uso de uma vazão de 14 mL/min sem exceder o limite de pressão da bomba.As micropartículas (dp < 2 μm) têm pequena resistência à transferência de massa a altas vazões. Por isso podem ser utilizadas com pouc...