Producción de taxol y taxanos relacionados en cultivos de células en suspensión de Taxus globosa (Schltdl)

Abstract

Problemática para el abastecimiento de taxol a partir de fuentes naturales.2.2.6 Fuentes alternas para la obtención y producción de taxol. 2.3. Cultivo in vitro de vegetales. 2.3.1. Establecimiento de cultivos vegetales. 2.3.2. Establecimiento de los cultivos de callo. 2.3.3. Establecimiento de los cultivos de células en suspensión. 2.3.4. Estrategias biotecnológicas para incrementar el metabolismo secundario en los cultivos in vitro. 2.3.5. Estimulación. II Pág. 2.3.6. Inmovilización celular. 2.3.7. Cultivo in vitro de diferentes especies del género Taxus. 2.4. Antecedentes generales sobre Taxus globosa Schltdl. 2.4.1. Descripción Botánica de T. globosa. 2.4.2. Características distintivas. 2.4.3. Biología y hábitat. 2.4.4. Distribución geográfica en México. 2.4.5. Aspectos fitoquímicos y actividad biológica de T. globosa. 2.4.6. Cultivo in vitro de T. globosa. 3. PLANTAMENTO DEL PROBLEMA Y JUSTIFICACIÓN 4. HIPÓTESIS 5. OBJETIVOS GENERALES 6. OBJETIVOS PARTICULARES 7. MATERIAL Y MÉTODOS 7.1. Establecimiento de los cultivos in vitro de T. globosa. 7.1.1. Inducción y establecimientos de los cultivos de callo. 7.1.2. Crecimiento celular y producción de taxanos en callos de T.globosa. 7.2. Establecimiento de cultivos de células en suspensión de T. globosa. 7.3. Determinación del tamaño de inóculo.7.4. Efecto del jasmonato de metilo (MeJ) en la estimulación de la producción de taxol y taxanos relacionados, en los cultivos tipo lote de células en suspensión de T. globosa.7.5. Evaluación del efecto del calcio (Ca 2+ ) y jasmonato de metilo (MeJ) sobre la producción de taxol y taxanos relacionados en cultivos tipo lote en dos fases, de células en suspensión de T. globosa. III Pág.7.6. Efecto de la inmovilización celular en los cultivos tipo lote en dos fases de células de T. globosa. 7.7. Metodología química y análisis cromatográfico. 7.7.1. Extracción de taxanos a partir de biomasa. 7.7.2. Extracción de taxanos a partir del medio de cultivo. 7.8. Identificación y cuantificación de taxanos por Cromatografía de Líquidos de Alta Resolución (CLAR). 7.9. Estimación de consumo de carbohidratos mediante CLAR.