Purity Control of the 3-Methyl-8-Piperazino-7- (Thiethan-3)-1-Ethylxanthine Hydrochloride Substance by High-Performance Liquid Chromatography

Abstract

Аннотация. Исследована возможность применения метода высокоэффективной жидкостной хроматографии в контроле чистоты субстанции 3-метил-8-пиперазино-7-(тиетанил-3)-1-этилксантина гидрохлорида. Изучено хроматографическое по-ведение субстанции и примеси исходного 8-бром-3-метил-7-(тиетанил-3)-1-этилксантина в разных системах элюента. Разра-ботана методика определения и проведена стандартизация содержания примеси исходного продукта 8-бром-3-метил-7-(тие-танил-3)-1-этилксантина в субстанции 3-метил-8-пиперазино-7-(тиетанил-3)-1-этилксантина гидрохлорида. Ключевые слова: ксантины, высокоэффективная жидкостная хроматография, примеси.Производные ксантина широко применяются в ка-честве средств, корректирующих систему гемостаза [1]. В настоящее время среди них продолжается поиск более эффективных и менее токсичных биологически активных соединений [2]. Синтезированы новые тие-тансодержащие производные 1-этилксантина, среди которых обнаружены соединения, проявляющие ан-тиагрегационную активность [3]. Одним из перспек-тивных соединений, оказывающих выраженное антиа-грегационное действие, является 3-метил-8-пипера-зино-7-(тиетанил-3)-1-этилксантина гидрохлорид [4]. Для получения разрешения на проведение клиниче-ских испытаний, помимо доклинического исследова-ния биологической активности, необходимо разрабо-тать методики контроля качества синтезированного со-единения, в том числе контроль посторонних примесей в субстанции.Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) широко применяется в анализе лекарствен-ных веществ и включена практически во все действу-ющие фармакопеи [5, 6]. Данный метод отличается вы-сокой чувствительностью и разделяющей способно-стью, возможностью исследования практически лю-бых веществ за короткий промежуток времени. По-этому ВЭЖХ является наиболее оптимальным мето-дом для определения примеси исходного продукта в субстанции 3-метил-8-пиперазино-7-(тиетанил-3)-1-этилксантина гидрохлорида.Цель работы. Разработка методики определения примеси исходного продукта в субстанции 3-метил-8-пиперазино-7-(тиетанил-3)-1-этилксантина гидрохло-рида методом ВЭЖХ.Материалы и методы. В качестве объектов иссле-дования нами использованы 6 опытных серий субстан-ции 3-метил-8-пиперазино-7-(тиетанил-3)-1-этилксан-тина гидрохлорида и образец исходного продукта 8-бром-3-метил-7-(тиетанил-3)-1-этилксантина.Исследование проводили на жидкостном хромато-графе LC-20 Prominence фирмы Shimadzu. Для прове-дения анализа были выбраны следующие хроматогра-фические условия:-хроматографическая колонка из нержавеющей стали (150 × 4,6 мм), заполненная обращённо-фазовым сорбентом Discovery® С18 с размером частиц 5 мкм; -объем раствора вводимой пробы -20 мкл; -подвижная фаза (ПФ): смесь ацетонитрила и 0,125 % водного раствора фосфорной кислоты в объемном соотношении 6:4; -режим элюирования -изократический; -скорость потока подвижной фазы -1,0 мл/мин; -детектор спектрофотометрический при двух дли-нах волн (λ) -282 нм и 290 нм.Для проведения исследования приготовлены следу-ющие растворы:-испытуемый раствор: 0,01 г (точная навеска) суб-станции ...