Introducción. El uso de los medicamentos para tratar el VIH-1 ha sido relacionado con la farmacorresistencia adquirida, que ha ido en incremento durante los últimos años. Objetivo. Describir el perfil de resistencia adquirida del VIH-1 en pacientes adultos, atendidos en 9 Unidades de Atención Integral del VIH de Guatemala. Metodología. Se analizó 61 registros de pacientes adultos VIH positivo, 41 en primer fallo y 20 en fallo múltiple, a quienes se solicitó la prueba de genotipo de enero del 2020 a junio del 2021. El análisis se realizó en el software DeepChek® v2.0, para la clasificación de la resistencia se siguió el algoritmo de Stanford HIVdb (v9.4 - 17/12/2022). Resultados. El 82.0% (IC 95% 70.0 - 90.6%) presentó resistencia a alguna familia de ARVs. La mayor resistencia por familia fue para los INNTR, principalmente EFV (94.4%) y NVP (97.2%) en pacientes con fallo a primer esquema y 92.9% para cada medicamento en pacientes con fallo a múltiples esquemas. Las mutaciones más frecuentes fueron M184V/I (54.0%, 24.0%) y K103N/S (58.0%, 22.0%) en fallo a primer esquema y fallo múltiple, respectivamente; y la I54V (6.0%) en pacientes con fallo múltiple. Conclusión. La elevada resistencia adquirida al VIH-1 en pacientes atendidos en distintas regiones del país, muestra la importancia de disponer/ampliar la cobertura a nivel nacional de pruebas de CV de VIH-1 para identificar tempranamente fallo a TAR y medicamentos óptimos para cambiar lo más pronto posible el esquema de ARVs en caso de fracaso confirmado del tratamiento.