This study was conducted in the Meia Ponte River basin, which is located in the Cerrado biome. The objective was to describe the structure of fish assemblages and to evaluate the results with the regard to the position of the tributaries (sampling stations) along the basin. This basin drains 35 municipalities of Goiás State. Springs of the Meia Ponte are located in the district of Itauçu (GO), in the Serra dos Brandões. Two sampling were conducted, one in the rainy season (March/2001) and another in the dry season (August/2001). Thirty sampling sites in tributaries and one in the channel of the Meia Ponte River, in its upper course, were selected to capture fish with dipnets (3 mm mesh) during one hour, along 100-m stretch. Sampling periods (season; rainy and dry) and the categorization according to the distance of the sampling station from the mouth of the Meia Ponte River (position; upper, intermediate and lower) were used to evaluate differences in fish assemblage structure, summarized by a detrended correspondence analysis (DCA), applied on the abundance data matrix, squared root transformed, to eliminate the effect of abundant species. The first two axes were retained for interpretation (eigenvalues = 0.35 and 0.24, for axis 1 and 2, respectively). The two-way ANOVA (factors seasons and positions) identified significant differences (p <0.05) in score averages for axis 1 and 2, for both factors. These results suggest significant differences in fish assemblage structure in the Meia Ponte River basin for the seasons (rainy and dry) and positions (upper, intermediate and lower) studied, in spite of the short spatial scale. These findings demonstrate a great ichthyofauna heterogeneity in the uppermost part of the Paraná River.Este estudo foi realizado na bacia do rio Meia Ponte, a qual está localizada no bioma cerrado. O objetivo foi descrever a estrutura da assembléia de peixes, relacionando os resultados com a distribuição longitudinal dos afluentes ao longo da bacia do rio Meia Ponte. Essa bacia hidrográfica drena 35 municípios Goianos, sendo suas nascentes localizadas no município de Itauçú (GO), na Serra dos Brandões. Foram realizadas duas coletas, uma no mês de março/2001 (chuva) e a outra em agosto/ 2001 (seca). Trinta afluentes e um ponto na calha do rio Meio Ponte, na sua porção mais superior, foram selecionados para a captura dos peixes, com uso de peneiras (3 mm) durante uma hora, em uma secção de 100 m. O período de amostragem (fase; seca e chuva) e a categorização em função da distância do ponto de amostragem até sua desembocadura (posição; alto, médio e foz) foram utilizados como fatores. O protocolo utilizado para avaliar a estrutura da comunidade considerou a análise de correspondência com remoção do efeito de arco (DCA), que sumarizou a matriz de abundância, transformada em raiz quadrada, para remover o efeito de espécies muito abundantes. Os dois primeiros eixos foram retidos para interpretação, com autovalores de 0,35 e 0,24, para o eixo 1 e 2, respectivamente. A ANOVA bifatorial (fase e posiç...