Selectivity of mutagenic action of synthetic polynucleotides

Abstract

Мутагенное действие ДНК, ДНК-и РНК-содержащих вирусов убедительно доказано [1]. Казалось вероятным, что не только природные, но и искусственно синтезированные полинуклеотиды смогут вызывать мутагенный эффект при условии, что их молекулы будут иметь молекулярную массу не менее нескольких сотен дальтонов (олиго-и мононуклеотиды, как правило, не мутагенны). Первую попытку оценить мутагенную активность некоторых синтетических полинуклеотидов сделали Фахми и Фахми [2]. Однако в их опытах полирибонуклеотиды (поли(А), поли(и), поли(и-С)) оказались слабо мутагенными, что, возможно, объяснялось использованием сравнительно низкополимерных препаратов. Кроме того, работа велась с мутациями типа «Minute» (утонченные щетинки), признаком очень ненадежным, часто мало отличающимся от нормы; учет числа несущих его особей субъективен. Наши первые опыты с двумя синтетическими полирибонуклеотидами полностью подтвердили предположения относительно их возможной высокой мутагенной активности [3]. Более того, оказалось, что эти полимеры обладали таким же избирательным мутагенным действием,, которое свойственно природным полинуклеотидам. Это побудило нас расширить работу по изучению мутагенных свойств синтетических полинуклеотидов, изучить частоту вызываемых ими мутаций, комплементационные взаимоотношения мутаций, их локализацию на хромосоме. Материалы и методы. Опыты проводили с двумя полидезоксирибонуклеотидами поли(сІА) и поли(сІТ) и четырьмя полирибонуклеотидами поли (А), поли(І), поли(ІІ) и поли(А, С). Препарат поли(А, С)-производства фирмы «Serva» ФРГ, остальные препараты синтезированы в Сибирском отделении АН СССР в Новосибирске и любезно переданы нам проф. Р. И. Салгаником. Все препараты полинуклеотидов состояли из смеси молекул с молекулярной массой 10 5-10 е , примесь белка-менее 1 %. Эти вещества в физрастворе инъецировали взрослым самцам Drosophila melanogaster нормальной линии Д-18, стандартно используемой в нашей лаборатории. Мухи получали в среднем по 0,25-0,30 мкг каждого из изучаемых полимеров. Поиск рецессивных леталей г индуцированных полинуклеотидами во второй хромосоме дрозофилы, вели общепринятым методом Cy/L 2. Самцы линии Д-18 были предварительно проверены на отсутствие летальных мутаций во второй хромосоме. Для этой цели самок тестерной линии Cy/L 2 индивидуально скрещивали с самцами Д-18, и в последующих скрещиваниях в F* изогенизировали отдельные вторые хромосомы линии 7-1-18; затем этим же методом оценирали частоту возникновения мутаций под влиянием мутагенов. Все хромосомы, содержащие летали, происходили от разных подвергавшихся воздействию самцов. Это исключало возможность появления «пучков», т. е. нескольких тождественных деталей вследствие митотической пролиферации гониальной хромосомы. Каждая летальная мутация была далее генетически подтверждена. В контроле самцы получали инъекции физиологического раствора (0,9% NaCl). Была проведена локализация ряда рецессивных летальных мутаций, возникших в• хромосомах мух, обработанных поли (А)-и поли (I)-мутагенами. Для этого осуществляли скрещивания типа BlL/CyXCy/1, г...