The neotropical freshwater systems have a high number of catfish species (Siluriformes), and many of those are denominated "cascudos" in Brazil. Cytogenetic data about three "cascudos" species fished in the rio Araguaia are described in the present study. The Pterygoplichthys joselimaianus showed 2n=52, with 28 metacentrics (M) chromosomes, 16 submetacentrics (SM) and 8 subtelocentrics/acrocentrics (ST/A) in both sexes. Hemiancistrus spinosissimus showed 2n=52, with karyotype formulae 26M+22SM+4ST, in both sexes. Hemiancistrus spilomma also showed 2n=52, but in this species a ZZ/ZW sex chromosome system (25M+21SM+6ST in females and 24M+22SM+6ST in males) was observed. The cells from H. spinosissimus and P. joselimaianus showed one chromosome pair bearing Ag-NORs, while in the H. spilomma three chromosome pairs bearing AgNORs were detected. The data showed in this work reveal particular chromosomal characteristics, important for a good recognition of both Hemincistrus species, and also show the importance of the insertion of cytogenetic data on taxonomic phylogenetic studies.Os sistemas de água doce neotropicais possuem um alto número de espécies de peixes Siluriformes, muitas das quais popularmente conhecidas como cascudos no Brasil. Dados citogenéticos sobre três espécies de cascudos, capturadas na bacia do rio Araguaia são descritos no presente trabalho. Pterygoplichthys joselimaianus possui 2n=52, com 28 cromossomos metacêntricos (M), 16 submetacêntricos (SM) e 8 subtelecêntricos/acrocêntricos (ST/A) em ambos os sexos. Hemiancistrus spinosissimus revelou 2n=52, com fórmula cariotípica 26M+22SM+4ST, nos dois sexos. H. spilomma também possui 2n=52, porém, nesta espécie foi observado um sistema de cromossomos sexuais do tipo ZZ/ZW (25M+21SM+6ST para fêmeas e 24M+22SM+6ST para machos). As células de H. spinosissimus e P. joselimaianus mostraram um par de cromossomos portadores de Ag-RONs. Em H. spilomma, três pares de cromossomos portadores de Ag-RONs foram observados. Os dados apresentados neste trabalho revelam características cromossômicas particulares, importantes para um bom reconhecimento de ambas as espécies de Hemiancistrus e mostram a importância da inserção dos dados citogenéticos nos estudos taxonômicos e filogenéticos.