Trichospilus diatraeae Cherian & Margabandhu, 1942 (Hymenoptera: Eulophidae) é um endoparasitoide pupal de lepidópteros e tem sido estudado como agente potencial no controle biológico de pragas. Para o desenvolvimento de técnicas de criação de parasitoides, é necessária a escolha do hospedeiro alternativo adequado, assim, o objetivo deste artigo é avaliar as características biológicas de T. diatraeae em relação aos hospedeiros Bombyx mori Linneaus (Lepidoptera: Bombycidae) e Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera: Crambidae), em laboratório. Doze pupas de B. mori e doze pupas D. saccharalis, com 72 e 24 h de vida, respectivamente, foram expostas ao parasitismo por 21 fêmeas parasitoides a 25 ± 1ºC, com umidade relativa de 70 ± 10% e fotofase de 14 h. A duração do ciclo de vida (ovo-adulto) de T. diatraeae foi de 19,44 ± 0,12 dias em pupas de D. saccharalis e 18,00 ± 0,05 dias em pupas de B. mori, a emergência de progênie do parasitoide foi 66,60% em pupas de D. saccharalis e 75,00% em pupas de B. mori. A progênie de T. diatraeae foi de 354,50 ± 43,21 por pupa de D. saccharalis e 469,11 ± 15,19 por pupa de B. mori. Trichospilus diatraeae demonstrou adequabilidade ao hospedeiro e sua capacidade de parasitar diferentes hospedeiros.