Structure‐activity studies of vasoactive intestinal peptide (VIP): cyclic disulfide analogs

Abstract

Analogs of vasoactive intestinal peptide with cysteine residues incorporated at selected sites within the sequence were prepared by solid phase methods, oxidized to the corresponding cyclic disulfides and purified to homogeneity by preparative HPLC. The cyclic compounds were assayed as smooth muscle relaxants on isolated guinea pig trachea, as bronchodilators in vivo in guinea pigs, and for binding to VIP receptors in guinea pig lung membranes. Of the analogs prepared at the N‐terminus, one compound, Ac‐[D‐C∼S6,D‐Cys11,Lys12,Nle17,Val26,Thr28]‐VIP, was found to be a full agonist with slightly more than one tenth the potency of native VIP. Most other cyclic analogs in the N‐terminal region were found to be inactive. A second analog, Ac‐[Lys12,Cys17,Val26,Cys28]‐VIP, was also found to be a full agonist with potency about one third that of native VIP. Furthermore, this compound was active as a bronchodilator in vivo in guinea pig, but with somewhat diminished potency as compared to native VIP. Strikingly, this cyclic compound was found to have significantly longer duration of action (>40 min) when compared to an analogous acyclic compound (5 min). The conformational restrictions imposed by formation of the cyclic ring structures may have stabilized the molecule to degradation, thus enhancing the effective duration of action. Analysis of this series of cyclic analogs has also yielded information about the requirements for the receptor–active conformation of VIP.

Πεπτίδια Με Πολλαπλούς Δισουλφιδικούς Δεσμούς

“…Η τεχνητή εισαγωγή επιπλέον δισουλφιδικών δεσμών σε πεπτίδια ή πρωτεΐνες επιτρέπει τη δημιουργία διαμορφωτικών περιορισμών που μπορούν να βελτιώσουν τη βιολογική δραστικότητα ή να προσδώσουν θερμική σταθερότητα. [9,[13][14][15][16][17][18][19][20] οξυτοκίνη. [7,12,[21][22][23][24] Η παρούσα ερευνητική εργασία εστιάζει σε πεπτίδια που περιέχουν μόνο ενδομοριακούς δισουλφιδικούς δεσμούς.…”

“…Η ανθρώπινη ρηλαξίνη, ένα πεπτίδιο που ομοιάζει με την ινσουλίνη, έχει παραχθεί με τοποεκλεκτικές μεθόδους, όπως αναφέρεται στη μελέτη των Biillesbach και Schwabe. [134] Ο στόχος αυτού του κεφαλαίου είναι να παρουσιάσει διαφορετικές χημικές προσεγγίσεις για το σχηματισμό ενός ή περισσότερων δισουλφιδικών δεσμών σε συνθετικά πεπτίδια και μικρές 15 -C(Acm) 16 - 15 -C(Acm) 16 -T( t Bu)-G 18 πεπτιδίου. [142] Παρατίθεται το αναλυτικό RP-HPLC καθώς και ESI-MS της κύριας κορυφής.…”

“…[142] Παρατίθεται το αναλυτικό RP-HPLC καθώς και ESI-MS της κύριας κορυφής. 15 -C(Acm) 16 -T( t Bu)-G 18 -O…”

“…Fmoc-A 6 -K(Boc)-C(Trt) 8 -S( t Bu)-R(Pbf)-L-M-Y( t Bu)-D( t Bu)-C(Mmt) 15 -C(Acm) 16 -T( t Bu)-Gly 18 -OH 15 -C(Trt) 16 -T( t Bu)-…”

“…Fmoc-A 6 -K(Boc)-C(Acm) 8 -S( t Bu)-R(Pbf)-L-M-Y( t Bu)-D( t Bu)-C(Mmt) 15 -C(Trt) 16 -T( t Bu)-G 18 -S( t Bu)-C(Acm) 20 -R(Pbf)-S( t Bu)-G-K(Boc)-C 25 Η εφαρμογή της στρατηγικής της οξείδωσης αρχικά του προστατευμένου πεπτιδίου και στη συνέχεια η κυκλοποίησή του δεν επέφερε τα αναμενόμενα αποτελέσματα όπως περιγράφηκε πιο πάνω, για αυτό ακολούθησε η στρατηγική που αφορά στην κυκλοποίηση του πεπτιδικού σκελετού να προηγείται της δημιουργίας των τριών δισουλφιδικών δεσμών. Η κυκλοποίηση της πεπτιδικής αλυσίδας του CyO2 αναφέρεται στη βιβλιογραφία ότι πραγματοποιείται μέσω φυσικής χημικής σύνδεσης (native chemical ligation).…”