RESUMO Objetivos: desenvolver e analisar as evidências de validade de conteúdo de um checklist para capacitação de enfermeiros na mensuração do volume vesical através da ultrassonografia. Métodos: estudo metodológico, constituído por três etapas: revisão da literatura; elaboração dos itens do instrumento; e análise das evidências de validade de conteúdo. O Índice de Validade de Conteúdo (IVC) e o AC2 de Gwet foram utilizados para as análises da validade de conteúdo. Resultados: o checklist foi composto por 23 itens. Os IVCs para clareza, relevância e dimensionalidade foram 0,99, 0,99 e 0,98 respectivamente, e os IVCs para AC2 de Gwet com coeficientes para clareza, relevância e dimensionalidade foram 0,89, 0,97 e 0,95, respectivamente, com p<0,001. Conclusões: o checklist desenvolvido para capacitação de enfermeiros na mensuração do volume vesical através da ultrassonografia alcançou adequadas evidências de validade de conteúdo, e pode ser utilizado para capacitação dos enfermeiros na prática clínica e futuras pesquisas.