Um equipamento de eletroforese capilar com detecção condutométrica construído em laboratório

Abstract

Recebido em 11/8/04; aceito em 30/3/05; publicado na web em 24/8/05A LABORATORY-MADE CAPILLARY ELECTROPHORESIS EQUIPMENT WITH CONDUCTOMETRIC DETECTION. A new construction of a capillary electrophoresis instrument with a universal conductivity detector (oscillometric detector) is described. The performance of the electrophoresis equipment was evaluated through the separation and detection of inorganic anions and cations in aqueous solutions. The results reproduced those found in the literature for the investigated probe ions, showing an efficient separation and good repeatability.Keywords: capillary electrophoresis instrument; oscillometric detector; inorganic ions. INTRODUÇÃOA importância da eletroforese capilar (CE) na análise de misturas complexas decorre da alta eficiência de separação e da simplicidade do equipamento utilizado 1 . O processo de separação dos componentes da mistura, injetada em um eletrólito de corrida que flui através do capilar, consiste no deslocamento do soluto sob a ação de um campo elétrico. As partículas ou íons migram na direção do cátodo ou do ânodo em função de sua carga específica 2 e a separação decorre das diferenças de mobilidade dos compostos iônicos ou ionizáveis presentes, da razão carga/volume das espéci-es e de fatores estruturais 3,4 . O eletroferograma, isto é, o registro gráfico do sinal do detector em função do tempo decorrido a partir da injeção da amostra, permite identificar e quantificar os componentes da mistura.A análise por eletroforese tem sua origem no método da fronteira móvel 5,6 . Posteriormente, para evitar o processo de convecção devido à força gravitacional, o tubo de vidro foi substituído por uma tira de papel ou empacotado com um meio quimicamente estável como pó de vidro, celulose ou gel 7 . Por sua vez, o efeito de convecção causado pela geração de calor devido à passagem de corrente elétrica através da solução foi minimizado por Hjertén pela rotação de um capilar com 3 mm de diâmetro interno (d.i. A escolha do método de detecção na eletroforese capilar depende, entre outros fatores, da compatibilidade do detector com as dimensões do capilar. Tradicionalmente, tem sido empregada a espectrometria de absorção molecular no UV-visível e, mais recentemente, a espectrometria de massas 1,11 . Por outro lado, as téc-nicas de detecção eletroquímica são especialmente adequadas à determinação de analitos que não são detectáveis por métodos ópticos 1,12-14 e quando são empregados tampões biológicos, que absorvem fortemente na região do ultra-violeta 15 . Para minimizar a interferência do elevado campo elétrico empregado na separação dos analitos no potencial do eletrodo de trabalho, emprega-se um desacoplador. Este consiste basicamente de uma fissura feita pró-xima da extremidade do capilar e coberta com um material poroso 1 . Este tipo de detecção apresenta como inconvenientes 13,14,16,17 a geração de gás no eletrólito de corrida, o maior tempo necessário para limpeza do eletrodo, seu alinhamento em relação à extremidade do capilar e sua calibração. O método ele...

Determinação simultânea de cátions empregando eletroforese capilar com detecção condutométrica sem contato em equipamento construído em laboratório

“…7 A Figura 3 mostra de maneira esquemática os detalhes da célula de detecção. A detecção é composta dos seguintes estágios: entrada do sinal de alta frequência, eletrodo de aplicação do sinal de alta frequência, eletrodo de detecção, conversor corrente/tensão, retificador com amplificação de 10x, filtro passa-baixas, buffer (ganho unitário), correção da linha de base com amplificação de 30x e circuito de proteção para a entrada da placa de interface (clamper).…”

“…A CE com detecção por condutividade sem contato possibilita a determinação rápida e simultânea de íons metálicos com limites de detecção da ordem de µmol L −1 . [5][6][7] Além disso, ela é vantajosa em comparação a outros métodos analíticos de separação, principalmente em relação aos baixos custos envolvidos na construção e manutenção do equipamento.…”

“…5,7,[9][10][11][12] Na grande maioria destes trabalhos, soluções tampão contendo uma mistura de ácido 2-N-morfolinoetanossulfônico (MES) e histidina (His) em meio ácido são empregados como eletrólitos de trabalho, que mantêm a condutividade de fundo em níveis relativamente baixos. Geralmente, são adicionados ao eletrólito de trabalho agentes complexantes como éter coroa, ácido α-hidroxi-isobutírico (HIBA), ácido lático (Hlac), ácido málico e ácido tartárico para alterar as mobilidades eletroforéticas dos íons metálicos, 1,4,6,[12][13][14][15][16][17][18] além de solventes orgânicos como metanol para melhorar a resolução dos sinais no eletroferograma.…”

Desenvolvimento de métodos simples e rápidos para determinação de fármacos por eletroforese capilar com detecção condutométrica sem contato (CE-C4D)

“…: eletroforese em gel) ou na análise de traços em amostras de baixa força iônica[108].Nos últimos anos, a CE tem chamado a atenção da comunidade científica, como sendo uma poderosa técnica para a separação e análise de compostos de interesse industrial, farmacêutico, clínico e ambiental, ao lado da cromatografia gasosa (GC) e da cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC). Por ter uma instrumentação relativamente simples, alguns grupos também idealizaram e construíram seus próprios equipamentos[131,133].Além da simplicidade, pode-se destacar outras vantagens como frequência analítica relativamente alta quando comparada com outras técnicas de separação (ideal para análises rotineiras). Outra característica é a versatilidade, pois uma única coluna capilar pode ser utilizada para a separação de classes de compostos completamente distintas (íons metálicos e compostos orgânicos simultaneamente), sendo necessária apenas a adequação da solução tampão utilizada nas corridas.…”