<p class="p1">El tomate de árbol (<em>Cyphomandra betacea</em>) es un frutal de importancia comercial en países como Bolivia, Colombia, Ecuador y Perú, donde se consume como fruta fresca y procesada. Tradicionalmente, es propagado por semillas y estacas, y enfrenta problemas de heterogeneidad y calidad de material de siembra. </p><p class="p1">En esta investigación se desarroll<em>ó </em>un protocolo para la micropropagación <em>in vitro </em>del tomate de árbol criollo del fenotipo naranja, proveniente de Costa Rica, el cual presenta potencial para la diversificación agrícola y la agroindustria. Se evaluaron dos tratamientos de desinfección <em>in vitro </em>con variaciones en la concentración del Ca(ClO)<span class="s1">2 </span>2,5% y 5,0% (i.a 75%), tres tratamientos para la multiplicación in vitro del material con diferentes reguladores de crecimiento y concentración de sales MS (1962), y seis tratamientos para el enraizamiento <em>i</em>n vitro con diversos reguladores de crecimiento y gelificantes. </p><p class="p1">Se determinó que la desinfección con 2,5% de Ca(ClO)<span class="s1">2 </span>fue la mejor para el establecimiento in vitro; el mejor medio de cultivo para la micropropagación del material fue el M1, compuesto por sales MS(1962) al 100%, sacarosa al 3%, phytagel<span class="s2"><strong><em>® </em></strong></span>1,8g/L, 0,5mg/L de AG<span class="s1">3</span>, 0,25mg/L de BAP y 2,0 mg/L de PaCa, el cual presentó el mejor balance entre el número promedio de brotación/explante y el número promedio de entrenudos/explante, sin formación excesiva de callo, mientras que el medio de cultivo E5, constituido por sales MS(1962) al 100%, agar 6,0g/L y sacarosa al 3%, sin reguladores del crecimiento y el medio de cultivo E6, que incluía las sales MS(1962) al 100%, agar 8,0g/L y sacarosa al 3%, sin reguladores del crecimiento, mostraron el periodo más corto para la formación de raíces, el mayor número promedio de raíces y la mayor longitud promedio de raíz y tallo. </p>