A má distribuição das chuvas pode limitar as trocas gasosas na cultura da cana-de-açúcar, podendo a irrigação mitigar esse efeito. Objetivou-se com este trabalho avaliar o efeito do uso de lâminas de irrigação aplicadas por gotejamentos subsuperficial pulsada e continua nas trocas gasosas da cana-de-açúcar. O experimento foi conduzido em campo na Estação Experimental de Cana-de-Açúcar de Carpina, no período de dezembro 2019 a dezembro de 2020. O delineamento experimental utilizado foi o casualizado em blocos, em arranjo fatorial 2 x 5, sendo estes dois tipos de aplicação da irrigação (irrigação pulsada e contínua) e cinco lâminas de reposição da evapotranspiração da cultura (40, 60, 80, 100 e 120% da ETc), com 4 repetições. A cultivar de cana-de- açúcar avaliada foi a RB 041443. A aplicação dos tratamentos foi realizada nos meses de agosto, setembro e outubro períodos esses de menores índices pluviométricos, por meio de um sistema de irrigação por gotejamento de subsuperfície. Foram analisados, aos 330 dias após o plantio, no horário entre 11 e 13 h com Analisador de Gás Infravermelho (IRGA LI-6400), as seguintes variáveis: temperatura foliar (Tleaf), concentração interna de CO2, (Ci), condutância estomática (gs), transpiração (E), fotossíntese líquida (A), eficiência instantânea de uso da água (A/E), eficiência intrínseca do uso da água (A/gs), e a eficiência instantânea de carboxilação (A/Ci). As melhores respostas fisiológicas para a fotossíntese líquida, condutância estomática e transpiração foram obtidas com a aplicação das lâminas de 85,1; 80,0 e 80,5% da ETc, respectivamente. Os maiores valores para as eficiências intrínseca e instantânea do uso da água foram obtidos com a aplicação da irrigação de forma pulsada.