ФОТОФИЗИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА НОВОГО АНАЛОГА ТИОФЛАВИНА Т, ФЛУОРЕСЦЕНТНОГО КРАСИТЕЛЯ DMASEBT, В ВОДНЫХ РАСТВОРАХ И ПРИ СВЯЗЫВАНИИ С АМИЛОИДНЫМИ ФИБРИЛЛАМИ, "Цитология"

Abstract

В настоящей работе исследованы фотофизические свойства нового аналога флуоресцентного зонда тиофлавина Т (ThT), транс-2-[4-(диметиламино)стирил]-3-этил-1,3-бензотиазолия перхлората (DMASEBT), в свободном состоянии в водных растворах и при связывании с амилоидными фибриллами. Получено подтверждение стабильности красителя в широком диапазоне pH раствора, в том числе в условиях получения исследуемых амилоидных фибрилл. С использованием специально разработанного подхода, основанного на спектроскопическом исследовании образцов, подготовленных методом равновесного микродиализа, показано, что встраивание DMASEBT в амилоидные фибриллы на основе инсулина приводит к длинноволновому сдвигу спектра его поглощения, а также к значительному возрастанию квантового выхода и времени затухания флуоресценции красителя. Кроме того, показано, что константы связывания ThT и DMASEBT с амилоидными фибриллами на основе инсулина имеют один и тот же порядок. На основании полученных результатов сделано заключение: DMASEBT обладает свойствами молекулярного ротора (что является ключевым моментом для флуоресцентного зонда), имеет сходный с ThT механизм взаимодействия с амилоидными фибриллами и улучшенные по сравнению с ThT спектральные характеристики, сдвинутые в область «окна прозрачности» биологических тканей; DMASEBT является перспективным диагностическим агентом для изучения амилоидных фибрилл.