Micropropagation is an important technique for clonal mass propagation and a tool for in vitro studies. One of the first steps to overcome in this process is the establishment of new explants in vitro. ‘Delite’ rabbiteye blueberry was cultured in vitro with four cytokinins (zeatin (ZEA), 6-(γ-γ-dimethylallylamino)-purine (2iP), 6-benzylaminopurine (BAP), and kinetin (KIN)) at eight concentrations (0, 2.5, 5, 10, 20, 30, 40, and 50 µM). Additionally, nine combinations of nitrogen salts were tested, using Woody Plant Medium (WPM) and a modified WPM as the basic medium. ZEA and 2iP showed better responses, but ZEA was superior at lower (2.5 µM) concentrations (89.7% survival, 81.3% shoot formation, 1.3 shoots, 13.8 mm shoot length, 10.0 leaves). BAP and KIN showed very low responses. In the combinations of salts with modified WPM, no differences were observed. However, the original WPM with treatments of 0.5 × NH4NO3 and 1 × Ca(NO3)2, 0.5 × NH4NO3 and 0.5 × Ca(NO3)2, and the modified WPM alone showed the lowest rates of survival and shoot formation and the shortest shoot lengths. The highest shoot lengths were observed in treatments with the original WPM, 1.5 × NH4NO3 and 0.5 × Ca(NO3)2, and 1.5 × NH4NO3 and 1.5 × Ca(NO3)2. This initial study with ‘Delite’ can be the basis for further experiments with different combinations of salts, 2iP, and ZEA.

O presente trabalho estudou as fases finais do processo de micropropagação, incluindo o enraizamento e a posterior aclimatização da amoreira-preta cv. Brazos. Os experimentos foram realizados no Laboratório de Micropropagação de Plantas da UFPR, Curitiba-PR, no período de março de 2000 a julho de 2001. No enraizamento in vitro com ou sem imersão em AIB, obteve-se mais de 95% de enraizamento nos dois tratamentos. No experimento de enraizamento ex vitro, com microestacas provenientes da multiplicação com diferentes citocininas, as taxas de enraizamento e sobrevivência foram de 100%. Na fase final, testou-se a influência da sacarose do meio de cultura de enraizamento in vitro na posterior aclimatização. Em todos os tratamentos, houve 100% de sobrevivência. Conclui-se que pode ser realizado um eficiente enraizamento in vitro sem AIB e sem a adição de sacarose ao meio de cultura, com posterior aclimatização em túnel plástico ou, ainda, realizar o enraizamento ex vitro e aclimatização em casa de vegetação com nebulização intermitente.

Rubber dandelion (Taraxacum kok-saghyz Rodin; TK) has received attention for its natural rubber content as a strategic biomaterial, and a promising, sustainable, and renewable alternative to synthetic rubber from fossil carbon sources. Extensive research on the domestication and rubber content of TK has demonstrated TK’s potential in industrial applications as a relevant natural rubber and latex-producing alternative crop. However, many aspects of its biology have been neglected in published studies. For example, floral development is still poorly characterized. TK inflorescences were studied by scanning electron microscopy. Nine stages of early inflorescence development are proposed, and floral micromorphology is detailed. Individual flower primordia development starts at the periphery and proceeds centripetally in the newly-formed inflorescence meristem. Floral organogenesis begins in the outermost flowers of the capitulum, with corolla ring and androecium formation. Following, pappus primordium—forming a ring around the base of the corolla tube—and gynoecium are observed. The transition from vegetative to inflorescence meristem was observed 21 days after germination. This description of inflorescence and flower development in TK sheds light on the complex process of flowering, pollination, and reproduction. This study will be useful for genetics, breeding, systematics, and development of agronomical practices for this new rubber-producing crop.

Blueberries are valued for their taste and their high nutritional benefits, including their antioxidant and antiinflammatory properties. In vitro culturing is an alternative method for clonal propagation, and has been used in many biotechnological studies. Most blueberry research is concentrated on highbush and lowbush taxa (Vaccinium corymbosum and Vaccinium angustifolium respectively), with only limited investigations of rabbiteye cultivars (Vaccinium virgatum) that are more suitable for subtropical climates and regions with warmer winters as a result of climate change. There is therefore a need to determine in vitro protocols for that species and group of cultivars. We examined here adventitious shoot regeneration in the 'Delite' rabbiteye blueberry cultivar. Leaf explants were cultured in vitro in Woody Plant Medium (WPM), and the effects of different thidiazuron (TDZ) concentrations, the orientation of the leaf (adaxial or abaxial surface in contact with the medium), and two portions of the leaf segment (basal or apical) were examined. De novo shoot development was studied using light and scanning electron microscopy. All concentrations of TDZ used showed similar survival and regeneration rates; 0.5 μM TDZ showed high efficiency in regenerating adventitious shoots (100%, with 57 adventitious shoots/ explant), as did the adaxial surface in contact with the medium using either the apical or the basal portion of the leaf (97% shoot regeneration, 47.5 adventitious shoots/explant). Anatomical analyses showed direct and indirect organogenesis. The shoots developed leaf primordia with stomata, trichomes, and well-developed vascular tissues, with further elongation and rooting of the plants. We therefore describe here a high-efficiency regeneration method through de novo shoot organogenesis using TDZ in foliar explants of rabbiteye blueberry, with direct and indirect organogenesis.

A amoreira-preta (Rubus sp.) é uma espécie propagada vegetativamente, principalmente pela estaquia de ramos e raízes. No entanto, há muitos problemas fitossanitários decorrentes desta técnica. Este trabalho objetiva definir um protocolo eficiente para a micropropagação de amoreira-preta, oferecendo uma alternativa aos métodos de propagação tradicionalmente utilizados no Brasil. Utilizaram-se plantas matrizes da cultivar Brazos, mantidas em casa de vegetação. Realizou-se um experimento de assepsia de segmentos nodais, testando a imersão em hipoclorito de sódio (0,5%) por 0, 10, 20 e 30 minutos. Na fase de cultivo inicial testaram-se concentrações (0; 1 e 2 g.L -1 ) do antioxidante PVP K 25 com ápices meristemáticos. Na fase de multiplicação, testaram-se as citocininas BAP, cinetina, zeatina, 2iP e tidiazuron nas concentrações de 5 e 10 mM, mais a testemunha. Este experimento foi repetido por mais três subcultivos. Outro experimento na fase de multiplicação foi realizado testando-se os meios de cultura MS, MS/2, AND, QL e WPM. Este experimento foi repetido por mais dois subcultivos. Na fase seguinte realizou-se um experimento de enraizamento in vitro com ou sem imersão em solução 1 mM de AIB. Outro experimento de enraizamento foi realizado em casa de vegetação com nebulização intermitente, com as plantas provenientes dos tratamentos do experimento de multiplicação com diferentes citocininas. Na fase final testou-se a influência da sacarose no meio de cultura de enraizamento na aclimatação em casa de vegetação em túnel plástico ou sob nebulização intermitente. Os resultados foram os seguintes. A contaminação dos explantes foi reduzida com a utilização de NaOCl em todos os tempos de imersão. O PVP, nas duas concentrações testadas, reduziu a oxidação. No experimento de multiplicação com citocininas, o tidiazuron não se mostrou viável devido à má formação dos brotos e crescimento exagerado de calos. As mais altas taxas de multiplicação foram obtidas com BAP, nas duas concentrações testadas, obtendo-se 4,4; 6,1; 7,9 e 2,6 brotos por micro-estaca para a concentração de 5 mM e 4,3; 4,7; 4,8 e 2,1 para 10 mM, na seqüência dos quatro subcultivos. No experimento de multiplicação com meios de cultura, nos três subcultivos houve uma tendência de maior taxa de multiplicação com o meio MS, apresentando 3,9; 4,3 e 2,5 brotos por micro-estaca para a primeira, segunda e terceira repicagens. No experimento de enraizamento in vitro, obteve-se mais de 95% de enraizamento nos dois tratamentos. No enraizamento ex vitro, as taxas de enraizamento e sobrevivência foram de 100%. No experimento de aclimatação, em todos os tratamentos houve 100% de sobrevivência. Pode-se concluir que um protocolo eficiente para a micropropagação de amoreira-preta é a assepsia com imersão por 10 minutos em NaOCl a 0,5%, com adição de 1 g.L -1 de PVP na fase inicial, multiplicação no meio MS com 5 mM de BAP e enraizamento in vitro sem AIB e sem a adição de sacarose ao meio de cultura, com posterior aclimatação em túnel plástico ou o enraizamento ex vitro e acl...