RESUMO. O presente trabalho teve como objetivo determinar as condições otimizadas da síntese enzimática de biodiesel, a partir do óleo de palma e etanol, empregando diferentes lipases imobilizadas (lipase de Pseudomonas fluorescens imobilizada em SiO 2-PVA e lipase de Candida antartica imobilizada em resina acrílica-Novozym  435) em meio isento de solvente. Uma matriz de planejamento fatorial foi utilizada para avaliar a influência da temperatura (42-58C) e a razão molar entre etanol e óleo de palma (6:1-18:1) no rendimento de transesterificação alcançado para cada preparação de lipase. Os efeitos principais foram ajustados por análise de regressão múltipla a modelos lineares e o rendimento máximo foi obtido quando o sistema operacional foi operado a 42C com substratos contendo etanol e óleo de palma na razão molar de 18:1. Os modelos matemáticos que representam o rendimento global da reação para cada lipase imobilizada foram considerados adequados para descrever os resultados experimentais.