Novel thermostable variants of glucoamylase (GA) from filamentous fungus Aspergillus awamori X100 were constructed using the directed evolution approach based on random mutagenesis by error-prone PCR of the catalytic domain region of glucoamylase gene located on a new episomal expression vector pPEHα in Pichia pastoris cells. Out of 3000 yeast transformants screened, six new thermostable GA variants with amino acid substitutions Val301Asp, Thr390Ala, Thr390Ala/Ser436Pro, Leu7Met/His391Tyr, Asn9His/Ile82Phe and Ser8Arg/Gln338Leu were identified and studied. To estimate the effect of each substitution in the double mutants, we have constructed the relevant single mutants of GA by site-directed mutagenesis and analyzed their thermal properties. Results of the analysis showed that only Ile82Phe and Ser8Arg substitutions by themselves increased enzyme thermostability. While the substitutions Leu7Met, Asn9His and Gln338Leu decreased the thermal stability of GA, the synergistic effect of double mutant variants Leu7Met/His391Tyr, Asn9His/Ile82Phe and Ser8Arg/Gln338Leu resulted in significant thermostability improvement as compared to the wild type GA. Thr390Ala and Thr390Ala/Ser436Pro mutant variants revealed the highest thermostability with free activation energy changes ΔΔG of 2.99 and 3.1 kJ/mol at 80°C, respectively.

A b s t r a c tThe experience of the study of wettability of oil reservoirs on the core material using the method of x-ray tomography. The process of hydrophobization of rocks significantly changes the geological and technological conditions of oil fields. Standard methods of evaluating the wettability of the reservoir do not give a fully reliable assessment of this important for the decision of technological problems of the parameter. Developed a method of evaluating the wettability of reservoirs, based on the scan x-ray emission of core samples in three states: the dry sample is saturated with water and residual water saturation. Method x-ray tomography allows to visualize the distribution pattern in the core areas with hydrophilic and hydrophobic surface. The connection of the hydrophobicity of the collectors with specific electrical resistance of rocks, which allows to assess their wettability to complexitivity data core and methods of geophysical research of wells. Keywords:X-ray tomography; X-ray contrast solution; Core; Wettability; Hydrophilic collector; Hydrophobic collector; Electrical resistivity; Lateral logs; Side logging; Injectivity © 2016 «OilGasScientificResearchProject» Institute. All rights reserved. ВведениеВ настоящее время для территории Пермского края ввиду длительной эксплуатации нефтяных месторождений актуальна задача стабилизации добычи. Основным объектом разработки являются терригенные пласты визейского возраста, эксплуа-тация которых идет, как правило, с применением методов интенсификации отборов и компенси-рующим это заводнением пластов. Анализ раз-работки ряда месторождений севера Пермского края показывает, что для них существуют зоны пониженного пластового давления с недостаточ-ной компенсацией отборов закачкой воды, что обусловлено низкой приемистостью нагнетатель-ных скважин.В работе [1] показано, что существует зако-номерность скважин с низкой приемистостью и аномально высокими удельными электрически-ми сопротивлениями (УЭС) коллекторов. Если в целом УЭС для терригенных пород, определенные методом бокового каротажа (БК), составляют от 1 до 100 Ом•м, то для некоторых пластов (зон) установлены аномальные сопротивления, которые могут превышать 1000 Ом•м. Высокие удельные сопротивления указывают либо на низкую водона-сыщенность пористой среды, либо на отсутствие непрерывности водной фазы, что может иметь место в гидрофобных системах. С учетом этого в работе [1] сделано предположение о связи участ-ков аномально высоких УЭС и низкой приемисто-сти скважин с гидрофобностью коллекторов.Гидрофобность коллекторов в свою очередь оказывает существенное влияние на эффектив-ность эксплуатации как нагнетательных, так и добывающих скважин. Так в работе [2] для терри-тории исследования приведены примеры изме-нения продуктивности скважин в различных гео-логических условиях разработки. С учетом этого для обоснования эффективных технологических решений необходима оценка степени гидрофоби-зации коллекторов.