Objetivo. Validar un método para la detección directa de L. monocytogenes en leche cruda. Materiales y métodos. Se utilizó un procedimiento de extracción con el agente caotropico NaI, para reducir la grasa en la muestra a un 0.2% p/v, el cual es mas bajo limite de detección con el método de Gerber para evitar la polimerización. Las muestras de leche cruda fueron analizadas por el método estandar de oro para la detección de L. monocytogenes. La detección por PCR fue realizada amplificando el segmento específico de 938bp de 16S ADNr. Los siguientes cebadores fueron utilizados L1 (CTCCATAAAGGTGACCCT), U1 (CAGCMGCCGCGGTAATWC), LF (CAAACGTTAACAACGCAGTA) and LR (TCCAGAGTGATCGATGTTAA) que reconoce el gen hlyA de L. monocytogenes y que amplifica un fragmento de 750bp.Resultados. El ADN de 39 cepas evidenció una alta especificidad de la técnica ya que todas las 39 L. monocytogenes amplificaron los fragmentos de 938bp y 750bp especie especifica. El límite de detección de la PCR fue de 101 CFU/ml. La reproducibilidad de la PCR mostró un Kappa de 0.85, la especificidad y sensibilidad fueron del 100%. El valor predictivo positivo y negativo fue del 100%. Conclusiones. Los resultados demostraron que es posible detectar Listeria spp usando cualquiera de los tres métodos ya que poseen la misma sensibilidad y especificidad. El 100% del valor predictivo positivo provee una alta posibilidad de detección en muestras positivas con listeria. EL método de extracción y la PCR estandarizada permiten en 15 días detectar L. monocytogenes en leches crudas. La técnica de PCR puede ser adaptada y validada otros tipos de alimentos como pollos, carnes y quesos.
Resumen El objetivo del estudio fue analizar los cambios en los sistemas de producción agrícola generados a través del tiempo con la intervención en la infraestructura del canal. El método aplicado fue Expost, se analizó dos etapas de tiempo: antes del mejoramiento del canal de riego y posterior a la modificación. Se identificaron elementos y factores en los sistemas de producción agrícola, mediante la técnica de entrevista y aplicación de mapas temáticos temporales. Se estudiaron los sistemas de producción agrarios y uso de suelo en las dos etapas de tiempo. Los resultados más relevantes fueron: a) El uso de suelo se mantenía en tres cultivos antes del mejoramiento del canal y se diversificó a 16 cultivos posterior a la intervención. b) Los sistemas de producción agrícola se intensificaron en monocultivos de tomate de árbol, maíz y fréjol en el 69 % del área de influencia del canal. c) El 31 % de 13 cultivos entre frutales y hortalizas. d) Se implementaron 1,5 ha de invernaderos y 4284 m 2 de reservorios. Como consecuencia de la implementación del canal se amplió el uso de pesticidas, fertilizantes químicos, empleo de maquinaria y costos de producción; de igual forma, los rendimientos se aumentaron con distintos impactos socioeconómicos y ecológicos. Palabras clave: análisis temporal; sistemas de producción; canal de riego; impacto socioeconómico y ecológico; Ecuador.
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