pela confiança e paciência, pelo conhecimento compartilhado e pela oportunidade de desenvolver este trabalho. À Dra. Lisandra Akemi Suzuki, pela ajuda no desenvolvimento desse trabalho e pelas conversas bem-humoradas.Aos meus pais e irmã, por acreditar em mim e me ajudarem de todas as formas para que eu pudesse chegar até aqui.Aos meus amigos que, de maneira indireta, tornaram este caminho mais fácil e alegre. RESUMOO lúpus eritematoso sistêmico (LES) é uma doença autoimune crônica caracterizada pela produção de anticorpos direcionados a uma grande variedade de componentes da própria pessoa, incluindo antígenos intracelulares do núcleo celular. A detecção de anticorpos contra o DNA nativo (ds) é um dos critérios de classificação para o diagnóstico do LES. O presente estudo teve como objetivo desenvolver uma técnica imunoenzimática (ELISA) quantitativa para a detecção de anticorpos IgG anti-DNAds. O desempenho da técnica ELISA foi comparado com o teste de imunofluorescência indireta com Crithidia luciliae (CLIFT) como referência. Anticorpos IgG anti-DNAds foram pesquisados por ELISA e CLIFT em amostras de soros de 127 pacientes com LES, 56 pacientes com outras doenças e 37 pessoas sadias. A técnica ELISA apresentou sensibilidade de 92,9% e especificidade de 94,6%, enquanto a sensibilidade e especificidade da técnica CLIFT foram de 85,8% e 100%, respectivamente. O teste Q de Cochran foi utilizado para comparar as sensibilidades e especificidades das reações (diferenças entre os resultados foram consideradas significantes quando p ≤ 0,05). De acordo com a análise estatística, a técnica ELISA apresentou sensibilidade significativamente maior do que a obtida com a técnica CLIFT (p=0,0027), enquanto a técnica CLIFT apresentou especificidade significativamente maior do que a obtida com a técnica ELISA (p=0,0253). A técnica ELISA também pode ser utilizada para determinar a avidez dos anticorpos IgG anti-DNAds. Os índices de avidez desses anticorpos em 15 amostras de soros de pacientes com LES, selecionadas aleatoriamente, variaram de 58,5% a 96,9%. A técnica ELISA para a pesquisa de anticorpos IgG anti-DNAds desenvolvida nesse estudo apresentou ótimos resultados em termos de sensibilidade e especificidade, podendo ser útil em pesquisa e rotina diagnóstica.Palavras-chave: lúpus eritematoso sistêmico, ELISA, anticorpos anti-DNA.
O lúpus eritematoso sistêmico (LES) é uma doença autoimune crônica, que se caracteriza pela produção de autoanticorpos direcionados a um grupo amplo e heterogêneo de componentes do próprio indivíduo, podendo afetar diversos órgãos, resultando em várias manifestações clínicas e anormalidades laboratoriais.O diagnóstico do LES é baseado em observações clínicas e testes laboratoriais. O presente estudo teve como objetivo desenvolver uma técnica ELISA simples e rápida para a pesquisa de anticorpos IgG anti-DNA nativo (DNAn). A técnica ELISA para a pesquisa de anticorpos anti-DNAn apresentou ótimos resultados em termos de sensibilidade (93,7%) e especificidade (97,9%), podendo ser de grande utilidade tanto na pesquisa como na rotina diagnóstica.
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