Huanglongbing (HLB) is a destructive citrus disease that is lethal to all commercial citrus plants, making it the most serious citrus disease and one of the most serious plant diseases. Because of the severity of HLB and the paucity of effective control measures, we structured this study to encompass the entirety of the citrus microbiome and the chemistries associated with that microbial community. We describe the spatial niche diversity of bacteria and fungi associated with citrus roots, stems, and leaves using traditional microbial culturing integrated with culture-independent methods. Using the culturable sector of the citrus microbiome, we created a microbial repository using a high-throughput bulk culturing and microbial identification pipeline. We integrated an in vitro agar diffusion inhibition bioassay into our culturing pipeline that queried the repository for antimicrobial activity against Liberibacter crescens, a culturable surrogate for the nonculturable “Candidatus Liberibacter asiaticus” bacterium associated with HLB. We identified microbes with robust inhibitory activity against L. crescens that include the fungi Cladosporium cladosporioides and Epicoccum nigrum and bacterial species of Pantoea, Bacillus, and Curtobacterium. Purified bioactive natural products with anti-“Ca. Liberibacter asiaticus” activity were identified from the fungus C. cladosporioides. Bioassay-guided fractionation of an organic extract of C. cladosporioides yielded the natural products cladosporols A, C, and D as the active agents against L. crescens. This work serves as a foundation for unraveling the complex chemistries associated with the citrus microbiome to begin to understand the functional roles of members of the microbiome, with the long-term goal of developing anti-“Ca. Liberibacter asiaticus” bioinoculants that thrive in the citrus holosystem. IMPORTANCE Globally, citrus is threatened by huanglongbing (HLB), and the lack of effective control measures is a major concern of farmers, markets, and consumers. There is compelling evidence that plant health is a function of the activities of the plant's associated microbiome. Using Liberibacter crescens, a culturable surrogate for the unculturable HLB-associated bacterium “Candidatus Liberibacter asiaticus,” we tested the hypothesis that members of the citrus microbiome produce potential anti-“Ca. Liberibacter asiaticus” natural products with potential anti-“Ca. Liberibacter asiaticus” activity. A subset of isolates obtained from the microbiome inhibited L. crescens growth in an agar diffusion inhibition assay. Further fractionation experiments linked the inhibitory activity of the fungus Cladosporium cladosporioides to the fungus-produced natural products cladosporols A, C, and D, demonstrating dose-dependent antagonism to L. crescens.

O conceito de qualidade em frutas e hortaliças varia para produtores, distribuidores e consumidores. No caso específico do melão, para o produtor, a qualidade refere-se à precocidade, robustez (resistência às doenças) e produtividade, enquanto que o distribuidor entende por qualidade a resistência do fruto ao manuseio e à longa vida de prateleira. Por outro lado, o consumidor considera a qualidade primeiramente pela aparência ou apresentação externa (formato, textura cor da casca), quando escolhe o fruto e, mais tarde, pela aparência interna (cor, textura e sabor da polpa), quando vai consumir o produto. Dessa forma, uma cultivar de melão para ter plena aceitação precisa aliar as características de produção, as caracterís- ticas inerentes à polpa (coloração, espessura da polpa, teores de açúcares e sabor) com aquelas que conferem maior conservação do fruto (McCreight et al.1993).Os produtores enfatizam que, para ter lucratividade, o melão precisa superar a faixa de 25 toneladas/ha. Alguns híbridos superam 40 toneladas. Entretanto, existem dificuldades na indicação de um mesmo híbrido para cultivo em toda essa região, dada a alta interação dos genótipos com o ambiente . Por outro lado, essa produtividade é comprometida caso ocorram viroses, cujo controle químico é pouco eficiente. De acordo com RubiesAntonell et al. (1996), o vírus do zucchini amarelo se disseminou com muita rapidez na Itália e em dois anos já era responsável por 30% das infecções no melão.Embora as plantas não sejam destruídas pelos vírus, os cultivos infectados têm o processo de produção severamente interrompido, produzindo frutos anormais e/ou deixando de produzir (Clough 1995). De acordo com Lima et al. (1996) sete vírus já foram constatados em cucurbitáceas no Brasil, entre eles o vírus-2 do mosaico da melancia (WMV-2), o vírus da mancha anelar do mamoeiro (PRSV-w), vírus do mosaico amarelo do zucchini (ZYMV), o vírus do mosaico do pepino (CMV) e o vírus do mosaico da abóbora (SqMV). O cultivo de genótipos resistentes tem sido indicado como a melhor forma de con- RESUMOProgênies de melão (Cucumis melo L.) cv. Tupã, um tipo que associa as características favoráveis do fruto do melão Amarelo e do melão Cantaloupe, foram submetidas à inoculação artificial com cinco vírus [Watermerlon mosaic virus (WMV-2), Papaya ringspot virus (PRSV-w), Zucchini yelow mosaic virus (ZYMV), Squash mosaic virus (SqMV) e Cucumber mosaic virus (CMV)], em casa de vegetação. A produção e a qualidade do fruto foram avaliadas em campo. Progênies de três famílias mostraram resistência ao PRSV-w e ao ZYMV, algumas manifestaram resistência também ao WMV-2. Cerca de 63,15% apresentaram resistência somente ao PRSV-w e 52,63% somente ao ZYMV. A resistência para a combinação do PRSV-w e ZYMV ocorreu em 42,10% das progênies e a resistência tripla a PRSV-w, ZYMV e WMV-2 em 36,84%. Uma progênie foi resistente aos quatro vírus (PRSV-w, ZYMV, WMV-2 e CMV). Para o cará-ter concentração de colheita o comportamento das progênies foi muito variável, observando-se progênies onde a met...

Research at the forefront of plant microbiome studies indicates that plant-associated microbes can alter the timing of plant development (phenology). However, it is unclear if host phenological stage affects microbial community assembly.

Understanding the functional mechanisms of the humoral and cellular immune responses among teleost broadens the possibilities for intervention and improvement of vaccination methods. The aim of this study was to evaluate the dynamics of the humoral immune response, hematological biochemical changes, and electrophoretic profile of proteins in Oreochromis niloticus, when submitted to antigen stimulation using sheep erythrocytes in a single dose and with booster doses. Seventy O. niloticus were distributed in two groups (n=35): one received a single dose and the other received two doses of antigen. Evaluations were made at the following predetermined times: zero (pre-immune, i.e., before inoculation with the first injection of sheep erythrocytes, negative control) and on 7th, 14th, 21st, and 28th days after the first immunization to evaluate the hemogram, biochemistry, and electrophoresis of proteins and direct hemagglutination. Twenty-eight days after antigen inoculation, it was observed that there had been an increase in the serum antibody titer and fractions gamma globulins after second antigen stimulation. The results suggest that teleost fish have the capacity to produce antibodies from a single stimulation, and a second antibody production wave after second stimulation.

RESUMO:A estreptococose é uma das principais causas de mortalidade na criação de tilápias no Brasil, causando grandes perdas econômicas. Assim, o estudo objetivou determinar a frequência de isolamento e identificação por PCR de Streptococcus agalactiae em diferentes órgãos de tilápias do Nilo (Oreochromis niloticus) naturalmente infectadas, oriundas de oito pisciculturas da região norte do estado do Paraná que apresentavam sinais clínicos característicos de infecção estreptocócica. Para tanto, coletaram-se amostras de sangue e fragmentos de rim, fígado, baço, coração e encéfalo. Essas foram semeadas em meio ágar infusão de cérebro e coração (BHI) adicionado 5% de sangue de ovino e incubados à 29ºC, durante 7 dias em aerofília. Após o crescimento bacteriano e a partir das características macro e microscópicas, foram selecionadas colônias compatíveis com as do gênero Streptococcus sp.. As espécies foram identificadas através de PCR e confirmadas por meio do sequenciamento do gene 16S rDNA. Os resultados demonstraram que em tilápias do Nilo infectadas com S. agalactiae, o isolamento é mais frequente em encéfalo, rim e fígado em ordem decrescente.