Investigations concerning sterols were made in one of strain each of nine species of bacteria and one representative of the basidiomyeetes through adsorption chromatography, gas chromatography and mass spectrometry as well as ultraviolet and infrared spectroscopy.Three strains contained sterols in quantities ranging from 0.0004 to 0.01 O i 0 of the dry weight. I n Azotobacter chroococcum six sterols were demonstrated. I n six strains sterols were not detectable. The limit of detectability at present is a t 0.0001 O/ , , sterol related to 100 g dry cells.From the extract of A erobacter cloacae, which contained no sterol, a C,,-hydroxy-ketone was isolated.

No abstract

No abstract

Steroidumwandelnde Enzyme aus MikroorganismenXII. Merkmale der Induktion der 4-En-3-oxosteroid : (Akzeptor)-1-en-oxidoreduktase in Nocardia opaca C. HOBHOLD, E. HULLER und G. ROSE (Eingegangen am 3.4.1979) 17~-Methyltestosterone and the corresponding l(2)-dehydrocompound (Dianabol) are efficient inducers of the 4-en-3-oxosteroid: (acceptor)-1-en-oxidoreductase from Nocardin opaca. After a lag period of 4 hours the enzyme activity increases rapidly. During the induction the steroids are completely metabolized causing a drastical drop of specific enzyme activity. Using a fixed induction time the optimal steroid concentration and the temperature characteristic were found out. The influence of the concentration of the steroid water suspension on the induction effect is discussed to be dependent on the velocity of the dissolving of the steroid particles.Chloramphenicol and streptomycin are powerful inhibitors of the induction process.Beini selektiven mikrobiellen Seitenkettenabbaii von Sterinen zu 4-En-3-0x0-verbindungen kommt der 4-En-3-oxosteroid : (Akzeptor)-1-en-oxidoreduktase (EC 1. 3. 99.4) (Steroid-1-Uehydrogenase) eine groUe Bedeutung zu. Genieinsam mit der 9a-Hydroxylase leitet sie den hierbei anerwunschten Skelettabbau ein. Andererseits spielt die Einfuhrung einer 1(2)-Doppelbindung bei der Glukokortikoidsynthese eine wichtige Rolle.In vorhergehenden Arheiten berichteten wir iiber die Reinigung, die prosthetische Griippe und die Uiiikehrharkeit der Reaktion des Enzyins (HORHOLD et al. 1976, LE-STROVAJA et ul. 1978, GROH et al. 1979). Im folgenden werden einige Ergebnisse ziir Enzyminduktion vorgestellt. Material und Nethoden Mikroorganismus : Noeardin opaea IRlET 7030 wurde aus der Stammsammlung des Zentralinstitutes fur Mikrobiologie und experimentelle Therapie, Jena, erhalten. Chemikalien : Die verwendeten Steroide wurden vom VEB J E~a P~a n h r . Jena, bezogen. 2,G-Dichlorphenolindophenol wurde von PHARMACIA Uppsala, Schweden, erhalten. Streptomycin und Chloramphenicol wurde von der Abteilung Antibioticaforschung (Dr. BRADLER) des 1nstit)ntes zur Vrrfiigung gestellt. Streptomycin wurde als Disulfat eingeset,zt nnd enthielt 710 SE/mg. Kultivierung und Enzymindnktion : Vorkultur I: Nocnrdia opaca IMET 7030 wrirde 24Std. bei 25 "C auf Schragagarrohrchen folgender Ziisammensetzung angezuchtet : 1% Dextrose, 17" Yepton (Blut), 0,176 Casaminoacids (DIFCO), 0,2% Hefeextrakt (DIFCO), 0,C;y; NaC1, 1,50/6 Agar-Agar, pH 7,0 (PRAUSER u. FALTA 1968). Vorkuhir 11: Je ein Rohrchen der Vorkultur I diente als Impfmat.eria1 fur 50 ml Niihrlosiiug entsprechend oben angegebener Zusammensetzung in 500-ml-Kolben. Die Submerskultur erfolgte 25 Std. bei 28 "C auf einem Rundschwingtisch mit einer Frequenz von 200 min-'.Induktion: Fur die Induktion wurde eine Nahrlosung nach MARCUS 11. TALALSY (1956) verwendet: O,l% XH,H,PO,, 0,l% (NH,), HPO,, 0,2% KH,PO,, 1% Hefeextrakt (DIFCO); 10 ml Spurenelementlosung ad 1000 ml aqua dest., pH 7,O. Zusammensetzung der Spurenelementlosung: 0,2% MgSO,, 0,l% PuaCI, 0,05yo FeSO,. 7 H,O, 0,05% Zn...

The induction of the 4-ene-3-oxosteroid: (acceptor)-1-ene-oxidoreductase in Nocardia opaca has been shown to be dependent on both hydrophilic and hydrophobic structural features of the steroid molecule, i.g. the nature of the oxygen function in positions 11 and 20 and the presence of the methyl group in position 10 influence the induction of the enzyme drastically. In this connection the metabolism of the steroid inductors being degradated during the induction process has been considered.