BACKGROUND Leptospirosis is an emerging zoonosis that affects humans and animals. Immunochromatography rapid test is widely used for early diagnosis of leptospirosis, but with low sensitivity and specificity. OBJECTIVES To evaluate Leptospira interrogans insoluble fraction as a potential antigen source for lateral flow immunochromatography. METHODS Insoluble fraction derived from the crude bacterial extract was obtained by serial centrifugation. The polypeptide profile was determined using sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE). Immune reactivity of this fraction was assessed by Western Blotting and lateral flow immunochromatography (LFI). It was tested 160 microagglutination test (MAT)-positive sera from patients in the acute phase, 100 MAT-negative sera from patients with acute febrile illness, and 45 patients with other infectious diseases. FINDINGS There was a predominance of low molecular mass-polypeptide bands, ranging from 2 to 37 kDa. The antibody reactivity of theses polypeptides was found to range from 13-50%, especially between 10 and 38 kDa. Among MAT-positive sera of patients with leptospirosis in the acute phase, 97% were also positive in LFI, indicating high sensitivity. Among MAT-negative sera, all were negative in LFI, indicating high specificity. Only 2% of cross-reactivity was detected. CONCLUSION The insoluble fraction can be a valuable antigen source for development of point-of-care diagnosis test for leptospirosis.

Introdução:A Leishmaniose Visceral Canina (LVC) continua sendo um problema de saúde pública. Esta doença é causada pelo protozoário Leishmania, sendo a Leishmania chagasi responsável por esta infecção no Brasil. Cães domésticos são um dos reservatórios do parasito e quando são picados pelo flebótomo, vetor desta doença, podem infectar os seres humanos. Apesar das medidas de controle, as notificações por Leishmaniose têm aumentado constantemente. O diagnóstico precoce e correto é muito importante, pois ajuda na prevenção e controle da doença. Bio-Manguinhos/Fiocruz-RJ, desde 2004, vem produzindo o conjunto diagnóstico para atender à demanda do Ministério da Saúde. Com a alteração do algoritmo de testagem da Leishmaniose Canina, houve a necessidade da manutenção do fornecimento do teste Elisa que passou a ser usado como confirmatório, sendo imprescindível a otimização nos processos de estocagem e transporte, facilitando a sua utilização pelo usuário final e possibilitando a redução de custos.Objetivo: Neste estudo testamos reagentes comerciais que possibilitem a armazenagem e o transporte de todo o kit entre 2 e 80 C. Atualmente, parte dos reagentes é mantida a -200C e outra sob refrigeração, o que implica em maior complexidade logística tanto de transporte como de estocagem e, consequentemente, maior custo.Metodologia: Resultados obtidos em ensaios com placas de Elisa sensibilizadas com antígeno de Leishmaniose (L.Major) e mantidas a -200C foram comparados aos obtidos com placas sensibilizadas com o mesmo antígeno e mantidas entre 2 e 80C. Nestas últimas, adicionouse um estabilizante que previne degradação e desnaturação, além de bloquear qualquer sítio livre na superfície da placa, minimizando possíveis reações cruzadas. Para mantermos o conjugado entre 2 e 80C, o mesmo foi diluído 1:10 em estabilizante e testado em ensaio imunoenzimático, comparando-se os resultados obtidos com os resultados do conjugado diluído em PBS-glicerol 80% e mantido a -200C. Para a conservação dos controles positivo e negativo, adicionouse 0,2% de azida sódica a fim de evitar contaminações no kit mantido entre 2 e 80C. Estes controles foram testados para avaliarmos possíveis interferências da azida sódica e a performance em relação aos mantidos à -200C.