Introducción: Clostridioides difficile (C. difficile) es la causa más común de diarrea asociada a la atención en salud en adultos. En Medellín, son frecuentes las infecciones asociadas al cuidado de la salud por este microorganismo en hospitales de alta complejidad.Objetivos: Identificar los factores clínicos y epidemiológicos asociados a la infección por C. difficile en un hospital universitario de alto nivel de complejidad de la ciudad de Medellín - Colombia.Métodos: Estudio epidemiológico transversal retrospectivo para determinar la prevalencia y evaluar posibles factores asociados a infección por Clostridioides difficile. Se incluyeron 156 pacientes internados en un hospital de alta complejidad de Medellín entre los años 2016 - 2018 que presentaron deposiciones líquidas con criterios clínicos de infección y a quienes se solicitó estudio de toxina para C. difficile (Immunocard®) con resultado positivo. Resultados: Se encontró una prevalencia general del 50 % y una mortalidad atribuible a infección por C. difficile de 11,5 %. El análisis de razones de prevalencia (RPa) mostró que los factores que incrementaron las posibilidades de la infección fue procedencia de zona urbana (RPa= 3,39; IC95 % 1,03 - 11,15), recibir antibióticos durante más de 22 días (RPa= 1,81; IC95 % = 1,11 - 2,95), antecedente de diabetes (RPa = 1,65; IC95 % = 1,16 - 2,35), neoplasia sólida (RPa = 1,64; IC95 % = 1,11 - 2,41) y hospitalización previa en la institución (RPa = 1,58; IC95 % = 1,13 - 2,21).Conclusión: En este trabajo se evidenciaron asociaciones con infección por C. difficile de factores similares a lo descrito en la literatura como las comorbilidades, exposición a antibióticos y la atención hospitalaria.