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RESUMO -O interesse na produção de lipases está relacionado ao seu potencial tecnológico em reações de esterificação e transesterificação. No entanto, os processos de produção e recuperação das enzimas possuem custos elevados, inviabilizando muitas vezes a sua utilização. Neste contexto a fermentação em estado sólido surge como alternativa para redução dos custos, uma vez que permite o uso de resíduos agroindustriais de baixo valor agregado e propicia a produção do biocatalisador mais concentrado. Dessa forma, neste trabalho, tem-se como objetivo estudar a produção de lipases utilizando o bagaço de cana como substrato. Os microrganismos utilizados foram o Penicillium sp. e o Bacillus megaterium e as condições operacionais estudadas foram temperatura (28, 33 e 38ºC), teor de umidade (40, 50 e 60%) e concentração do indutor óleo de oliva (1, 3 e 5%), através de um planejamento fatorial (3 3 ). O microrganismo melhor produtor de lipases foi o Penicillium sp. (0,3 UI/g substrato ), embora ainda muito baixo e com uma diferença muito pouco significativa quando comparada com a do B. megaterium (0,2 UI/g substrato ). O teor de umidade do meio de cultivo interferiu na produção enzimática para ambos os microrganismos.