The emergence of highly contagious influenza A virus strains, such as the new H1N1 swine influenza, represents a serious threat to global human health. Efforts to control emerging influenza strains focus on surveillance and early diagnosis, as well as development of effective vaccines and novel antiviral drugs. Herein we document the anti-influenza activity of the anti-infective drug nitazoxanide and its active circulating-metabolite tizoxanide and describe a class of second generation thiazolides effective against influenza A virus. Thiazolides inhibit the replication of H1N1 and different other strains of influenza A virus by a novel mechanism: they act at post-translational level by selectively blocking the maturation of the viral hemagglutinin at a stage preceding resistance to endoglycosidase H digestion, thus impairing hemagglutinin intracellular trafficking and insertion into the host plasma membrane, a key step for correct assembly and exit of the virus from the host cell. Targeting the maturation of the viral glycoprotein offers the opportunity to disrupt the production of infectious viral particles attacking the pathogen at a level different from the currently available anti-influenza drugs. The results indicate that thiazolides may represent a new class of antiviral drugs effective against influenza A infection.

Severe acute respiratory syndrome (SARS) is a newly emerging, highly transmissible and fatal disease caused by a previously unknown coronavirus (SARS-CoV). Existing in non-identified animal reservoirs, SARS-CoV continues to represent a threat to humans because there is no effective specific antiviral therapy for coronavirus infections. Objectives Starting from the observation that cyclopentenone cyclooxygenase (COX) metabolites are active against several RNA viruses, we investigated the effect of the COX inhibitor indomethacin on coronavirus replication. Methods Work involving infectious SARS-CoV was performed in biosafety level 3 facilities. SARS-CoV was grown in monkey VERO cells and human lung epithelial A549 cells, while canine coronavirus (CCoV) was grown in A72 canine cells. Antiviral activity was analysed by determining infective virus titres by TCID50, viral RNA synthesis by Northern blot analysis and real-time RT-PCR, and viral protein synthesis by SDS-PAGE analysis after 35S-methio-nine-labelling. Antiviral efficacy in vivo was determined by evaluating virus titres in CCoV-infected dogs treated orally with 1 mg/kg body weight indomethacin (INDO). Results Unexpectedly, we found that INDO has a potent direct antiviral activity against the coronaviruses SARS-CoV and CCoV. INDO does not affect coronavirus binding or entry into host cells, but acts by blocking viral RNA synthesis at cytoprotective doses. This effect is independent of cyclooxygenase inhibition. INDO's potent antiviral activity (>1,000-fold reduction in virus yield) was confirmed in vivo in CCoV-infected dogs. Conclusions The results identify INDO as a potent inhibitor of coronavirus replication and suggest that, having both anti-inflammatory and antiviral activity, INDO could be beneficial in SARS therapy.

Direzione ASL Lecco, (4) Direzione Sanitaria AO Lecco (5) Centro Nazionale per la Qualità degli Alimenti e per i Rischi Alimentari ISS Listeria monocytogenes, batterio trasmesso ingerendo cibi contaminati, può dare sepsi, infezioni a livello del sistema nervoso centrale e aborto settico. Recentemente è stato dimostrato che la listeriosi si manifesta anche come infezione gastrointestinale non invasiva. Per facilitare la ricerca di L. monocytogenes nei casi di gastroenteriti, che esula dalla pratica routinaria, abbiamo cercato di dimostrare la possibile estensione del campo di applicazione del sistema automatizzato ELFA VIDAS LMO2 (bioMérieux), validato AFNOR per le matrici alimentari, a campioni fecali. Sono state allestite una coltura di L. monocytogenes e una di L. innocua ad una concentrazione di 10 8 cellule/ml, da cui sono state prodotte diluizioni fino a raggiungere concentrazioni di 30 cellule/ml finali. 5 campioni di feci sono stati contaminati con diluizioni delle due colture a concentrazioni di 30, 150, 300, 750, 1500, 3000 cellule/ml. I campioni sono stati inoculati in 9 ml di brodo half-fraser; un'aliquota di feci è stata inoculata senza contaminazione artificiale. Dopo incubazione a 30°C per 24 h si è proceduto all'analisi con il sistema immunoenzimatico e semina nel terreno cromogeno Rapid'L. mono (Bio-Rad), anche questo validato per le matrici alimentari. 2 campioni inoculati con la diluizione più bassa di L. monocytogenes sono risultati negativi con il sistema immunoenzimatico dopo 24 ore, ma positivi dopo altre 24 ore di incubazione, mentre tutti gli altri sono risultati positivi. I campioni senza inoculo e quelli inoculati con L. innocua sono sempre risultati negativi. L'esame colturale ha confermato questi risultati. I risultati ottenuti indicano che il sistema automatizzato VIDAS LMO2 risulta sensibile e specifico, fornisce risposte in tempi brevi e richiede un impegno di tempo minimo da parte dell'operatore. Questo lavoro è preliminare ad un progetto per valutare, utilizzando sia il sistema automatizzato VIDAS che il terreno cromogeno, la prevalenza di L. monocytogenes in patologie gastroenteriche nella provincia di Lecco, ricerca epidemiologicamente importante se si tiene conto che nel 2003 all'Ospedale di Lecco sono state ricoverati 4 casi di sepsi da Listeria. (94) 1 (6) 0 (0) CEFOTAXIME 16 (100) 0 (0) 0 (0) P032Conclusioni: 16/145 (11%) tamponi faringei sono stati positivi per la ricerca di S. pyogens, tutti isolati da soggetti con diagnosi di faringotonsillite. La percentuale di ceppi eritromicina resistenti riscontrata nel territorio è significativamente superiore ai più recenti dati nazionali che si aggirano intorno al 30% ed induce ad una seria riflessione sul possibile ruolo giocato dalla prescrizione di macrolidi con conseguente aumento della pressione selettiva esercitata dagli stessi. P033 ATTIVITA' " IN VITRO " DI LINEZOLID VERSO ENTEROCOCCHI E PNEUMOCOCCHI DI ISOLAMENTO CLINICOColombo R., Facchini M., Restelli A., D'Accico M., Arosio A., Moschin A., Scarazatti E. U.O.Micr...