BACKGROUND:The total nucleated cell dosage of umbilical cord blood (UCB) is an important factor in determining successful allogeneic hematopoietic stem cell transplantation after a minimum human leukocyte antigen donor-recipient match. The northern South American population is in need of a new-generation cord blood bank that cryopreserves only units with high total nucleated cell content, thereby increasing the likelihood of use. Colombia set up a public cord blood bank in 2014; and, as a result of its research for improving high total nucleated cell content, a new strategy for UCB collection was developed. STUDY DESIGN AND METHODS: Data from 2933collected and 759 cryopreserved cord blood units between 2014 and 2015 were analyzed. The correlation of donor and collection variables with cellularity was evaluated. Moreover, blood volume, cell content, CD341 count, clonogenic capacity, and microbial contamination were assessed comparing the new method, which combines in utero and ex utero techniques, with the conventional strategies. RESULTS:Multivariate analysis confirmed a correlation between neonatal birth weight and cell content. The new collection method increased total nucleated cell content in approximately 26% and did not alter precryopreservation and post-thaw cell recovery, viability, or clonogenic ability. Furthermore, it showed a remarkably low microbial contamination rate (1.2%). CONCLUSION:The strategy for UCB collection developed at the first Colombian public cord blood bank increases total nucleated cell content and does not affect unit quality. The existence of this bank is a remarkable breakthrough for Latin-American patients in need of this kind of transplantation. U mbilical cord blood (UCB) transplantation is an alternative to marrow (BM) and mobilized peripheral blood (PB) transplantation in candidate patients who lack a suitable compatible donor.1,2 The clinical advantages of UCB transplantation compared with BM and PB include faster availability, a lower incidence and severity of graft-versus-host disease (GVHD), higher human leukemic antigen (HLA) mismatch permissiveness, and a higher proportion of primitive hematopoietic stem/progenitor cells, resulting in longer In this work, we analyze data from the public Colombian UCB bank (Col CBB), including variables affecting blood volume and TNC counts. We also report a new collection procedure combining in utero and ex utero techniques, which results in significant increases in blood volume and TNC counts and a lower contamination rate. We also demonstrate that this collection method has a minimal impact on cellularity after volume reduction, post-thawing recovery, and the clonogenic capacity (ClonE) before and after cryopreservation. MATERIALS AND METHODS Cord blood donor eligibility and collectionThis study was conducted at the Col CBB (from Instituto Distrital de Ciencia, Biotecnolog ıa e Innovaci on en Salud [IDCBIS]) using data from UCB units collected between 2014 and 2015 at five public hospitals in the Bogota Capital District (Hospital Occ...
Objetivo. Este trabajo tiene como objetivo describir la frecuencia de alelos y de haplotipos de antígenos HLA de clases I y II en población mestiza colombiana.Metodología. Se estudiaron 197 individuos colombianos no emparentados y 157 individuos emparentados que conformaban 53 familias, provenientes de diferentes regiones del país, remitidos para estudios de HLA de clases I y II por el método PCR-SSP a los laboratorios de inmunología del Hospital Militar Central de Bogotá y al Instituto de Referencia Andino.Resultados. El haplotipo HLA-A*24 B*35 DR*04 fue el más frecuente en la población estudiada, lo cual concuerda con otros estudios de mestizos colombianos.Conclusiones. El desequilibrio de Hardy-Weinberg hallado en la población analizada en el presente estudio, debe alertar sobre una eventual reducción en el repertorio de respuesta inmunitaria en los colombianos, lo cual podría ser el origen de una consecuente fragilidad de la población frente a nuevas infecciones que podrían convertirse en epidemias.
Objetivo. La resistencia a los medicamentos antirretrovirales se ha asociado con mutaciones características en los genes que codifican las enzimas que son el blanco de la terapia antirretroviral. En el presente trabajo se busca evaluar, desde el punto de vista cualitativo y cuantitativo, las diferentes mutaciones reveladas por la tipificación molecular de virus procedentes de diferentes pacientes remitidos al Instituto de Referencia Andino, en Bogotá, para la genotipificación con fines terapéuticos.Diseño: Se hizo la tipificación de un total de 1.064 mutaciones diferentes en virus procedentes de 16 pacientes no relacionados entre sí, con solicitud de genotipificación del VIH para análisis de sensibilidad a antirretrovirales. Se procedió a la tabulación de las mutaciones encontradas en cuatro categorías principales: a-mutaciones asociadas a resistencia, b- mutaciones silenciosas, c- polimorfismos genéticos por fuera de los sitios asociados a resistencia, y de mutaciones en sitios de resistencia que hasta el momento no han sido asociadas a resistencia.Metodología. Se seleccionaron, en estricto orden de llegada, 16 muestras de sangre en EDTA de pacientes con solicitud de genotipificación del VIH para análisis de sensibilidad a antirretrovirales. Se extrajo el ARN viral de cada muestra por el método QIAamp® y se procedió a su amplificación por medio de la PCR con transcriptasa inversa (RT-PCR). Una vez amplificado el ácido nucleico viral, se procedió a su tipificación molecular en el secuenciador LongReadTower-Opengene®, utilizando el estuche Trugene HIV-1®. Las secuencias obtenidas se transcribieron a hoja electrónica Excel®, y se hizo un cálculo de frecuencias de mutaciones por conteo directo. Resultados. Se revelaron por el método de secuenciación viral 1.064 mutaciones diferentes entre las que solamente 164 (15,4%) estaban asociadas a resistencia a los antirretrovirales (68 en el gen de la retrotranscriptasa o transcriptasa inversa y 96 en el gen de la proteasa). El 84,5% restante corresponde a polimorfismos (n=301), mutaciones silenciosas (n=564) y a otras mutaciones (n=35) que hasta el momento no han sido asociadas con resistencia, pero que pueden ser fuente de fracasos recurrentes en los tratamientos antirretrovirales. Se encontraron tres genotipos virales idénticos en tres pacientes de diferente procedencia en el país, lo cual puede constituir un indicador de utilidad ejemplar para la trazabilidad epidemiológica de esta virosis, en la medida en que la coincidencia de perfiles de mutación en virus aislados a partir de diferentes pacientes se puede asociar a la infección con una misma cepa circulante en una región determinada. Se presenta la cartografía molecular de las 1.064 mutaciones diferentes identificadas en 16 pacientes estudiados, enla cual se revelan codones cuya secuencia muta con mayor frecuencia. Entre los que están asociados con resistencia al tratamiento antirretroviral, se encontró que el codón 63 de la proteasa, con 18 mutaciones, y el codón 184 de la retrotranscriptasa, con 14 mutaciones, alojaron la mayor cantidad de variantes en losvirus secuenciados en este estudio preliminar. Conclusiones. La tipificación genética del VIH puede servir de fundamento molecular a investigaciones epidemiológicas, más allá de su evidente utilidad en el estudio de la resistencia a antirretrovirales, para lo cual se están utilizando exclusivamente estos análisis hoy en día.
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