-(A new rapid and sensitive enzymatic method for extraction and quantification of starch in plant material). In this work we compare methods normally used for starch determination in plant materials. The comparison between chemical (McCready's method) and an enzymatic method proposed here showed that although McCready's method is appropriate for most plant materials, in certain cases where cell wall polysaccharides (pectins and hemicelluloses) are present, the results may be significantly altered. However, using the enzymatic method described here afforded accurate estimation of starch content in such tissues. The enzymatic method proposed in this work is an affordable option for precise determination of starch contents in several plant tissues. Key words: hydrolases, starch, storage carbohydrates RESUMO -(Novo método enzimático rápido e sensível de extração e dosagem de amido em materiais vegetais). Neste trabalho é feita uma comparação entre os métodos mais comumente utilizados para a dosagem de amido em materiais vegetais. A comparação entre um método químico (McCready) e o método enzimático proposto neste trabalho mostra que, embora o primeiro seja apropriado para a maioria dos materiais vegetais, nos casos em que polissacarídeos de parede celular (pectinas e hemiceluloses) estão presentes, os resultados podem ser bastante alterados. Entretanto, ao usar o método enzimático apresentado, foi possível obter estimativas acuradas dos conteúdos de amido de diversos tecidos vegetais. O método proposto neste trabalho é uma opção viável para determinação do conteúdo de amido em diversos tecidos de plantas. Palavras-chave: amido, carboidratos de reserva, hidrolases IntroduçãoO amido é um dos principais compostos de reserva em plantas. Ao longo da evolução tem sido usado não somente como reserva para a própria planta, mas também como uma das mais importantes fontes de energia para os níveis subseqüentes da cadeia alimentar nos ecossistemas (Zeeman et al. 2004). Por esta razão, vários organismos adquiriram a capacidade de produzir enzimas que degradam o amido com subseqüente liberação de glucose e uso no metabolismo energético.O amido é composto por unidades de glucose, organizadas em dois homopolissacarídeos, a amilose e a amilopectina. A amilose praticamente não apresenta ramificações, sendo que as unidades de glucose são conectadas por ligações glicosídicas do tipo α (1,4) e a porcentagem de ramificações α (1,6) é menor do que 1% (Ball et al. 1998). A amilopectina, uma das maiores biomoléculas conhecidas, é altamente ramificada e possui cadeias de resíduos de glucose ligados entre si por ligações glicosídicas do tipo α (1,4) com aproximadamente 5% de ramificações α (1,6) (Myers et al. 2000). Dependendo da origem, o amido possui diferentes proporções de amilose e de amilopectina. Normalmente as proporções variam em torno de 1:3 e 1:4, mas há extremos encontrados em mutantes, como nos mutantes "waxy" de milho, cujo amido não possui amilose (Nelson & Pan 1995).Em células vegetais, o amido é armazenado na forma ...
In this study, the different stages of somatic embryogenesis (SE) of the African oil palm (Elaeis guineensis Jacq.) were characterized biochemically. The total soluble sugars, starch, total free amino acids, and total proteins were extracted, identified and quantified at various stages of embryogenesis: zygotic embryos (initial explants), primary calluses, embryogenic calluses, calluses with pro-embryos, globular embryos, differentiated somatic embryos, and regenerated plants. It was found that at the onset of induction of SE, the level of soluble sugars in the tissues of the explants fell by half. During this period, the total soluble sugars present in the cultures consisted basically of glucose and fructose. In the process of regeneration and maturation, the concentrations of soluble sugars gradually increased, reaching the highest values in the last two stages of development. At this stage, the disaccharide sucrose accounts for more than 80 % of the composition of total soluble sugars in the explants. Compared to starch, we found that the concentrations thereof in developing tissues are inversely proportional to that of soluble sugars virtually throughout embryogenic development. As for free amino acids, we found that after 30 days of induction until formation of the embryogenic calluses, there is an accentuated synthesis of total free amino acids in the explant tissue. In this stage, there was a significant increase in the levels of alanine and serine in the tissues. However, after the formation of the embryogenic calluses, the levels of total free amino acids present in the cultures become stabile and remain constant until the end of cultivation. Similar results were found for total protein, which also showed a significant increase at the onset of induction, undergoing slight changes during the remainder of the cultivation.
RESUMO -Com este trabalho objetivou-se investigar a aquisição da capacidade germinativa e o estabelecimento da dormência em sementes em desenvolvimento de Bixa orellana L. (urucum). Foram caracterizados 7 estádios de desenvolvimento das sementes, baseados nas características morfológicas, massa fresca, massa seca e teor de umidade dos frutos e das sementes. Sementes imaturas de B. orellana não germinaram durante os estádios iniciais de seu desenvolvimento. As sementes adquiriram a capacidade germinativa máxima quando os níveis de umidade declinaram para valores em torno de 60%. Nessa fase, as sementes apresentaram acúmulo máximo de massa seca. A dormência foi estabelecida quando as sementes exibiam um conteúdo de água em torno de 10%. TERMOS ADICIONAIS PARA INDEXAÇÃO: Tegumento, dessecamento, dormência GERMINATION IN DEVELOPING SEEDS OF Bixa orellanaABSTRACT -The objective of this work was to investigate the acquisition of germination capacity and the onset of dormancy in developing seeds of Bixa orellana L. (annatto). Seven stages of development were characterized with regard to morphology, fresh and dry mass and moisture content of the fruits and seeds. Immature seeds of B. orellana did not germinate during early stages of their development. The seeds achieved their maximum germination capacity after the moisture content had declined to around 60%. In this phase the seeds presented maximum dry mass. The onset of dormancy occurred when the seeds exhibited water contents around 10%. ADDITIONAL INDEX TERMS: Desiccation, dormancy, tegmen INTRODUÇÃODurante o seu desenvolvimento, a semente de uma angiosperma passa por três fases distintas: histodiferenciação ou morfogênese inicial, expansão celular concomitante à fase de acúmulo de reserva, e a fase final, que corresponde ao dessecamento (Thaker, 1999). O dessecamento constitui um evento integrante do processo do desenvolvimento da maioria das sementes, especialmente as ortodoxas (Kermode et al., 1986).
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